Функции регулятивные: регулятивная функция — это… Что такое регулятивная функция?

регулятивная функция — это… Что такое регулятивная функция?

регулятивная функция

Толковый переводоведческий словарь. — 3-е издание, переработанное. — М.: Флинта: Наука. Л.Л. Нелюбин. 2003.

• регистр
• регулятивная функция текста

Смотреть что такое «регулятивная функция» в других словарях:

• Регулятивная функция права — направление правового воздействия, выражающееся в установлении позитивных правил поведения, предоставление субъективных прав и возложении на субъектов права юридических обязанностей. Содержанием регулятивной функции охватывается: а) закрепление… …   Элементарные начала общей теории права

• Регулятивная функция правосознания — присущее правосознанию, как и норме права, свойство нормативности. Правосознание не только отображает право, правовое поведение, но и влияет на них, т.е. управляет поведением своего носителя. Это свойство правосознания особо важно для юристов.… …   Элементарные начала общей теории права

• регулятивная функция текста — то же, что координационная функция текста …   Толковый переводоведческий словарь

• Охранительная функция права — направление правового воздействия, связанное с охраной регулируемых правом отношений путем возможного применения к правонарушителю, предусмотренных в праве мер принудительного воздействия. Специфика охранительной функции состоит в том, что она… …   Элементарные начала общей теории права

• СОЦИАЛЬНАЯ ФУНКЦИЯ

  — отношение двух социальных объектов, при котором изменению одного из них сопутствуют изменения другого объекта. В социальных науках под функциями понимаются некоторые устойчивые характеристики объекта, совокупность которых дает общее представление …   Социология: Энциклопедия

• ПРАВО — общая мера свободы, равенства и справедливости, выраженная в системе формально определенных и охраняемых публичной (государственной) властью общеобязательных норм (правил) поведения и деятельности социальных субъектов. Этимологически слово право… …   Современный философский словарь

• Правосознание — это одна из форм общественного сознания, представляющая собой систему правовых взглядов, теорий, идей, представлений, убеждений, оценок, настроений, чувств, в которых выражается отношение индивидов, социальных групп, всего общества к… …   Википедия

• СОЦИОЛОГИЯ РЕЛИГИИ — специальная социологич. теория, изучающая генезис, соц. функции, место и роль религии в об ве, ее структуру. Религия рассматривается в качестве соц. подсистемы в общем соц. контексте, исследуются взаимосвязи религиозных групп, общностей, ин тов с …   Российская социологическая энциклопедия

• Чтение — вид речевой деятельности, направленный на смысловое восприятие графически зафиксированного текста. Целью Ч. является получение и переработка письменной информации. С этой точки зрения Ч. (как и слушание) относится к рецептивным видам речевой… …   Педагогическое речеведение

• ПРАВОСОЗНАНИЕ — сфера общественного, группового и индивидуального сознания, отражающая правовую действительность в форме юридических знаний, оценочных отношений к праву и практике его применения, правовых установок и ценностных ориентации, регулирующих… …   Энциклопедия юриста

Функции права — урок.

Обществознание, 9 класс.

Значение права в жизни общества трудно переоценить. Оно незримой нитью пронизывает значительную часть общественных отношений, начиная своё воздействие на человека тогда, когда он ещё находится на раннем этапе социализации, постепенно усложняясь. Так возникает воспитательная функция права.

Воспитательная функция права — это способность права влиять на мысли и чувства людей, формируя их правосознание и стимулируя правомерное поведение.

Разумеется, одной воспитательной функцией право бы обойтись не могло. Государство контролирует и регулирует жизнь общества посредством права. Государству принадлежит монопольное право на издание законов, которые и являются регуляторами всех сфер жизни общества. Иными словами, право выполняет также регулятивную функцию.

Регулятивная функция права — это направление правового воздействия, призванное обеспечить чёткую организацию общественно-полезных отношений во всём их многообразии.

Это означает, что благодаря регулятивной функции права происходит законодательное обоснование должного поведения людей в сфере имущественных, финансовых, семейных и иных правоотношений.
Но, к сожалению, далеко не всегда поведение людей в спорных вопросах, даже и регулируемых нормами права, оказывается именно должным. Это, в свою очередь, приводит к нарушению правовых норм, установленных государством, и ущемляет права отдельных лиц. Следовательно, государство должно отреагировать на такое поведение и восстановить правовую справедливость. Говоря иначе, государство должно охранять права граждан и воздействовать на лиц, посягающих на эти права. Отсюда вытекает охранительная функция права.

Охранительная функция права — это направление правового воздействия, имеющее целью охрану положительных, а также пресечение и предотвращение вредных для общества отношений.

Главная задача охранительной функции права — предотвращение нарушений правовых норм.

 

Государство при реализации охранительной функции обладает значительными полномочиями:

• определяет, какие деяния относятся к противоправным, и запрещает их, предостерегая от возможного нарушения права;
• определяет меру ответственности за совершение противоправных деяний;
• непосредственно применяет санкции к лицам, совершившим противоправное деяние.

Обрати внимание!

Право является критерием правомерности или неправомерности поведения людей в обществе.

Именно с позиции права мы можем оценить правильность или ошибочность деяния человека для общества. Следовательно, праву присуща оценочная функция.

Оценочная функция права — это определение критерия правомерности или неправомерности поведения человека при взаимодействии с обществом.

При правомерном поведении человека исключается применение к нему негативных санкций со стороны государства.
В рамках оценочной функции права применяются не только охранительные нормы, которые предусматривают негативное воздействие на нарушителя. Также существуют и поощрительные нормы, предусматривающие положительные санкции.

Пример:

группа лиц по предварительному сговору напала на инкассаторов, похитив значительную сумму денег. Однако момент нападения и побега грабителей был замечен проезжавшим мимо на автомобиле человеком, который моментально сообщил об этом по телефону, что помогло оперативно задержать преступников. Преступники получили суровый приговор суда — это охранительная функция права — а гражданину, своевременно сообщившему о преступлении, была объявлена официальная благодарность — это поощрительная санкция.

Регулятивные и охранительные альтернативные обязательства в современном гражданском праве России

Разделение обязательств на регулятивные и охрани­тельные является вполне традиционным для отечествен­ной цивилистики. В основе данной классификации лежат различные правовые нормы — регулятивные и охранитель­ные, на основе которых и возникают обязательственные правоотношения. В свою очередь, выделение регулятивных и охранительных правовых норм базируется на дифферен­циации их целевого назначения и имеет в качестве своих корней существование двух основных «собственно юриди­ческих» функций права в целом — регулятивной и охрани­тельной.

Гражданское право как часть всей правовой систе­мы также реализует регулятивную и охранительную функции, присущие праву в целом. Специфика предме­та гражданско-правового регулирования обуславливает роль гражданского права, которая состоит, прежде всего, в регулировании нормальных экономических отношений в обществе.

Оно имеет дело не столько с правонарушения­ми, сколько с организацией обычных имущественных вза­имосвязей. Именно поэтому оно содержит минимальное количество необходимых запретов и максимум возможных дозволений. С помощью гражданско-правового инстру­ментария участники имущественных отношений самостоя­тельно организуют свою деятельность с целью достижения необходимых им результатов. Таким образом, регулятив­ная функция гражданского права заключается в предостав­лении участникам регламентируемых отношений возмож­ностей их самоорганизации, саморегулирования.

Это обусловлено частным характером отношений, входящих в предмет гражданского права, и отличает регу­лятивную функцию в гражданском праве от аналогичной функции в публичном праве, где регламентация соот­ветствующих отношений носит жестко определенный ха­рактер, почти не оставляя места свободному усмотрению участников.

Охранительная функция гражданского права имеет первоочередной целью защиту имущественных интере­сов участников гражданского оборота. Она направлена на поддержание имущественного состояния добросовестных субъектов в положении, существовавшем до нарушения их прав и интересов. Поэтому по общему правилу охрани­тельная функция гражданского права реализуется путем восстановления нарушенных прав либо компенсации причиненных потерпевшим убытков. Компенсаторно­восстановительная направленность обусловлена эквива­лентно-возмездной, стоимостной природой имуществен­ных товарно-денежных отношений.

Важный аспект охранительной функции составляет также предупредительно-воспитательная (превентивная) задача, заключающая в стимулировании и организации такого поведения участников регулируемых отношений, которое исключало бы необоснованное ущемление или на­рушение чужих интересов. Наиболее отчетливо эта функ­ция выражена в деликтных и иных правоохранительных обязательствах. Здесь охранительная функция гражданско­го права тесно связана и взаимодействует с основной, регу­лятивной функцией.

Выделение регулятивной и охранительной функций права явилось предпосылкой классификации правовых норм в зависимости от функционального (целевого) на­значения на регулятивные и охранительные. Регулятивные нормы права — предписания, устанавливающие права и обязанности участников правоотношений. Охранительные нормы права регулируют общественные отношения, свя­занные с юридической ответственностью и применением мер государственного принуждения.

В свою очередь, поскольку нормы права лежат в осно­ве возникновения правоотношений, следовательно, в за­висимости от того, регулятивная или охранительная нор­ма явилась основанием возникновения правоотношения, различают регулятивные и охранительные правоотно­шения.

 

Первые связаны с установлением позитивных прав и обязанностей и их реализацией. Они представляют со­бой нормальное явление в жизни общества и возника­ют из правомерных действий субъектов, они являются формой осуществления норм права. Охранительные воз­никают в результате нарушения правовых предписаний и связаны с применением государственного принужде­ния, их цель — защита существующего правопорядка, возмещение причиненного вреда, наказание правонару­шителей.

В результате правомерного поведения субъектов пра­ва на основе норм права и в строгом соответствии с ними возникают регулятивные правоотношения. Таких правоот­ношений подавляющее большинство, в их существовании и развитии заинтересовано общество.

Охранительные правоотношения возникают вслед­ствие неправомерного поведения субъектов как реакция общества и государства на такое поведение. Цель правоо­хранительных правоотношений — защита существующего в обществе нормального порядка отношений, наказание пра­вонарушителя. В рамках охранительных правоотношений ответчик возмещает причиненный его действиями матери­альный ущерб, на правонарушителя налагается штраф, пре­ступник привлекается к уголовной ответственности и т. д.

Обязательства, как вид правоотношений, также могут быть классифицированы на регулятивные и охранительные в зависимости от характера правовой нормы, послужившей основанием возникновения конкретного правоотношения. При этом к регулятивным обязательствам относят договор­ные и иные обязательства, возникающие из правомерных действий, соответственно, к охранительным традиционно относят обязательства из причинения вреда и из неоснова­тельного обогащения.

По нашему мнению, к охранительным обязательствен­ным правоотношениям следует также относить право­отношения, возникающие в связи с неисполнением или ненадлежащим исполнением договоров. Во-первых, по­скольку эти отношения являются следствием нарушения прав и законных интересов одной из сторон в регулятив­ном обязательственном правоотношении, следовательно, они возникают в связи с правонарушением, гражданским проступком. Нарушение договора нельзя расценить как правомерное действие (бездействие). Если охранительные правоотношения возникают вследствие неправомерного поведения субъектов, а нарушение договора (обязатель­ства) является таковым, следовательно, отношения, воз­никающие вследствие неисполнения или ненадлежащего исполнения обязательства, должны быть отнесены к кате­гории охранительных правоотношений.

Во-вторых, охранительные нормы могут быть закре­плены и часто закрепляются не только в законе, но и в до­говоре, по согласованной воле сторон регулятивного обяза­тельственного правоотношения. Вне зависимости от того, в договоре или в законе устанавливаются нормы, опреде­ляющие последствия нарушения обязательства, эти нормы имеют охранительный характер, поскольку направлены на защиту нарушенных прав и законных интересов пострадав­шей от неисполнения (ненадлежащего исполнения) дого­вора стороны и обеспечивают восстановление имуществен­ного состояния добросовестных хозяйствующих субъектов в положении, существовавшем до нарушения их прав и ин­тересов, т. е. выполняют компенсаторно-восстановительную функцию. Иными словами, имея договорную природу воз­никновения, нормы, предусматривающие последствия нарушения обязательства, являются охранительными по своим функциям. Недопустимо смешивать классифика­цию норм по функциям права (охранительные и регуля­тивные) и по основаниям возникновения (договорные или нормы, установленные в законе). Так же как законодатель­но установленные нормы могут быть и охранительными, и регулятивными, так и нормы, установленные соглашением сторон в договоре, могут быть различной функциональной направленности и относиться либо к регулятивным, либо к охранительным. Следовательно, отношения, возникающие на основе охранительных норм, закрепленных в договоре, также являются охранительными.

В-третьих, в основе охранительных правоотношений, возникающих из причинения вреда и неосновательного обогащения, лежит вред, причиненный имуществу или личности потерпевшего субъекта гражданского права. Це­лью этих правоотношений является восстановление нару­шенного права и компенсация ущерба, причиненного пра­вонарушением. Однако очевидно, что имущественный вред может быть причинен и в рамках договорных отношений и часто является следствием неисполнения или ненадлежа­щего исполнения договоров. То есть в рамках договорных правоотношений действиями (или бездействием) одной из сторон другой стороне может быть причинен имуще­ственный вред, который станет основанием возникновения охранительных отношений. Отношения, возникающие в результате нарушения договоров, направлены на защиту имущественных интересов стороны, пострадавшей в связи с неисполнением или ненадлежащим исполнением дого­вора (обязательства), что является очевидным выражением охранительной функции гражданского права.

Таким образом, представляется, что некорректно огра­ничивать охранительные гражданские обязательственные правоотношения обязательствами из причинения вреда и неосновательного обогащения. В группу охранительных гражданских правоотношений должны быть включены отношения, возникающие вследствие нарушения обяза­тельств посредством неисполнения или ненадлежащего исполнения.

Разделение обязательственных правоотношений на регулятивные и охранительные представляет собой наи­более общую классификацию обязательств. Первая группа охватывает обязательства, которые юридически опосреду­ют нормально возникающие экономические отношения (купли-продажи, подряда, перевозки). Вторая группа охва­тывает обязательства, которые возникают, когда перемеще­ние материальных благ и закрепление их за определенными лицами в том или ином звене оказывается нарушенным.

Содержание регулятивных обязательств в основном определяется волей сторон либо диспозитивными прави­лами законодательства, в то время как содержание охрани­тельных обязательств формируется в основном на основе императивных предписаний закона. Хотя не исключено возникновение регулятивных обязательств на основе за­конодательно установленных норм, равно как и возникно­вение охранительных обязательств возможно в результате действия норм, установленных договором.

Иногда данная классификация считается равнознач­ной разделению обязательств на договорные и внедого- ворные. Последнюю группу часто называют деликтными обязательствами, что не является точным. Данная класси­фикация проведена по критерию основания возникнове­ния обязательств — обязательства, возникающие из догово­ров (договорные), и обязательства, возникающие из иных оснований (в том числе и из деликта, но необязательно только из него — внедоговорные). В числе внедоговорных выделяются обязательства из правомерных действий и из деликтов.

 

Представляется, что эти две классификации имеют са­мостоятельное значение и не должны смешиваться. Первая проводится по целевому характеру и правовой природе нормы, лежащей в основе возникновения обязательствен­ного правоотношения (регулятивный характер правовой нормы или охранительный), в то время как вторая класси­фикация основана на источнике возникновения правоотно­шения — договор, закон, правонарушение и т. п. При этом первая классификация очевидно является более логичной, поскольку, как отмечается в научной литературе, разделе­ние обязательств на договорные и внедоговорные искус­ственно разделяет однородные по сути обязательства из различных сделок (договоров и, например, односторонних сделок, не являющихся договорами), а с другой — объединя­ет в одну группу обязательства из правомерных действий (сделок, или обязательств, возникающих на основе закона) и из правонарушений.

Примечательно, что исторически первым видом обя­зательственных правоотношений были именно охрани­тельные правоотношения, а само обязательственное право имеет своим источником деликтные отношения.

Виднейший русский цивилист начала прошлого века И.А.Покровский, исследуя общую историческую эволю­цию обязательств, пришел к выводу, что древнейший за­родыш обязательственных отношений кроется в области гражданских правонарушений, в сфере деликтов.При этом понятие долга (SAuld) появилось не сразу, ему пред­шествовало понятие ответственности (Haftung).

Древнейшее право не вмешивалось в отношения меж­ду лицами по поводу частных правонарушений — посяга­тельств на жизнь, здоровье, имущество. До возникновения уголовного права всякое посягательство вызывало в каче­стве естественной реакции месть потерпевшего и его близ­ких. Факт посягательства создавал между посягнувшим и потерпевшим личное отношение, связывающее стороны (пострадавшего и обидчика) отношениями мести. Какого- либо долга на обидчике перед потерпевшим еще нет, он не обязан, но ответственен перед потерпевшим, ответственен самой своей личностью.

Однако мщение заключает в себе значительный эле­мент риска для самого мстящего, вследствие чего нередко начинает замещаться соглашением о выкупе. Но это со­глашение еще не создает обязательства для обидчика: обя­занности уплатить сумму установленного вознаграждения еще нет, скорее это право: уплатив штраф, обидчик осво­бождается от личной ответственности, а при неуплате все возвращается в прежнее состояние, т. е. к отношениями ме­сти. В соглашении о выкупе связанным становится скорее пострадавший (потерпевший) — он связан тем, что обязан воздержаться от мщения при получении выкупа.

Вредное влияние мщения на общественную жизнь, порождающее продолжительную, долговременную, пере­ходящую из поколение в поколение и длящуюся веками вражду между целыми семьями, родами, кланами, застав­ляет власть подчинить отношения ущерба своей регламен­тации. Государство запрещает месть, а вместо нее санкцио­нирует в качестве обязательного порядок уплаты штрафа как выкупа.

С установлением частных обязательных штрафов впервые возникает юридическое представление о некото­ром долге (Schuld) одного лица другому: обидчик должен теперь сумму штрафа потерпевшему. Но неисполнение этой обязанности еще долго влечет за собой последствия личного характера для обидчика — его передают в полное распоряжение пострадавшего с возможным превращени­ем в раба или даже с возможностью уничтожения.

Договор, как самостоятельный источник обязательств, появляется значительно позже. Одним из наиболее ранних видов договорного обязательства является поручитель­ство в виде заложничества: лицо, обязанное к исполнению чего-либо, дает противной стороне заложника, являюще­гося как бы гарантией исполнения. При неисправности исполнения обязательства заложник остается в распоря­жении кредитора, который может его убить, продать или удержать у себя как раба, т. е. истинный должник как бы остается в стороне, а вся ответственность переносится на за­ложника.

Более логично древнее римское обязательство фор­мального займа — nexum: должник при заключении до­говора обрекал свою личность на случай неисправности в полное распоряжение кредитора. Вследствие неиспол­нения договора кредитор получал власть над личностью должника.

При этом разница в сумме долга не оказывала ника­кого влияния на последствия неисполнения договора — неуплата большой или маленькой суммы влекла за собой одинаково полное поступление должника во власть кре­дитора.

Дальнейшее развитие обязательственных отношений идет в направлении постепенного ослабления и полнейше­го уничтожения личной ответственности должника. Сна­чала запрещается убийство или продажа должника, затем рабство у кредитора трансформируется в долговую кабалу, длящуюся только до отработки долга. Позже частное за­держание кредитором заменяется долговыми тюрьмами и приобретает форму наказания за неисправность.

На первый план в обязательстве выступает имуще­ственная сторона. С развитием экономического оборота обязательство становится основной его формой. Обязатель­ства из договоров начинают постепенно превалировать над обязательствами из деликтов.

Идея личного мщения исчезает, а вместе с ней отпада­ет личная ответственность должника, заменяемая на обра­щение взыскания на его имущество. Целью обязательства в большинстве случаев становится получение известной имущественной ценности от должника. Личность должни­ка исчезает за его имуществом. «Обязательство связывает не волю должника, а только обязывает его имущество. Долг есть только уменьшение его имущества, а не его свободы. Долговое право есть часть имущественного права».

Обязательство стало имущественным отношением, правом кредитора на получение некоторой ценности иму­щества должника и само сделалось объектом оборота по­средством переуступки прав требования.

Таким образом, появившись изначально как охра­нительные правоотношения, возникавшие вследствие не­правомерного поведения, нарушения прав и законных интересов, обязательства с развитием экономико-правовых отношений постепенно утратили исключительно деликт­ный характер. Значительная часть современного обяза­тельственного права регулирует абсолютно правомерное поведение участников отношений, возникающих на основе согласованной воли их участников (договорные обязатель­ства) или на основе законодательных предписаний.

 

Обязательства с альтернативно установленной множе­ственностью объекта (предмета) исполнения не являются чисто теоретической категорией в российском граждан­ском праве. Принцип «свободы договора» (п. 1 ст. 8, п. 2, 3 ст. 421 ГК РФ) допускает существование любых видов обязательств, не противоречащих прямым законодатель­ным запретам и соответствующих общим началам и смыс­лу гражданского законодательства. Более того, наличие в Гражданском кодексе РФ ст. 320, определяющей исполне­ние альтернативного обязательства, косвенно подтвержда­ет признание на законодательном уровне такой разновид­ности обязательств, как альтернативные.

Стоит признать, что альтернативные обязательства не очень распространенное явление в российском граждан­ском обороте, что отчасти зависит от весьма скудного пра­вового регулирования этого вида обязательств, но в основ­ном объясняется спецификой содержания альтернативных обязательственных правоотношений. Обычная практика делового оборота основана на очень четком осознании контрагентами своих потребностей, в связи с чем объект обязательств чаще всего устанавливается предельно кон­кретно. Довольно трудно представить себе ситуацию, ког­да кредитору по договору, например, поставки абсолютно безразлично, приобретет он в результате исполнения до­говора машины или велосипеды. Или машины одной или другой марки. Большинство договоров содержат макси­мально точное определение предмета (объекта) обязатель­ства: указывается не только марка покупаемого автомоби­ля, но и модель, цвет, комплектация и т. п. Современный покупатель подробнейшим образом формулирует свои требования и готов платить деньги за совершенно опреде­ленное материальное благо (вещь, работу или услугу). И чаще всего продавец, т. е. должник в обязательственном правоотношении, может предоставить кредитору вполне ограниченный перечень товаров, работ или услуг. Хотя, ко­нечно, выбор есть практически всегда.

С другой стороны, нет никаких законодательных огра­ничений для того, чтобы покупатель определял несколько видов в равной степени устраивающих его исполнений — альтернативно устанавливал по соглашения с продавцом различные объекты одного и того же обязательства. Иден­тичная ценность различных видов удовлетворений весьма индивидуальная оценочная категория, и то, что для одного хозяйствующего субъекта не сопоставимо, для другого име­ет одинаковую значимость. И если покупателю одинаково нужны и груши, и яблоки, то ничто не мешает ему заклю­чать договор поставки, альтернативно определяя предмет исполнения. Из этого положения с очевидностью следует, что абсолютное большинство альтернативных обязательств возникает посредством заключения договоров или на осно­ве односторонних сделок.

В то же время российский гражданский оборот зна­ет случаи возникновения альтернативных обязательств на основе законодательно установленных норм. Например, альтернативно установлен объект обязательства, возникаю­щего между обществом с ограниченной ответственностью и выходящим из его состава участником данного общества по выплате денежной суммы, соответствующей стоимости доли участника, либо предоставлению ему имущества та­кой же стоимости.

Возникающие на основе регулятивных договорных или законодательных норм альтернативные обязательства относятся к регулятивным обязательствам. При этом в них проявляется динамическая регулятивная функция граж­данского права, поскольку обязательственные отношения вообще и альтернативные обязательства в частности опо­средуют перемещение материальных благ, т. е. связаны с динамикой имущественных отношений.

Поскольку, как отмечалось выше, регулятивная функ­ция гражданского права заключается в предоставлении участникам регламентируемых отношений широких воз­можностей их самоорганизации, саморегулирования, условия договорных регулятивных альтернативных обяза­тельств устанавливаются сторонами обязательства самосто­ятельно. Это позволяет предположить, что типы договор­ных альтернативных обязательств регулятивной правовой природы ограничены только потребностями гражданского оборота и фантазией хозяйствующих субъектов. Однако стоит признать, что регулятивные альтернативные обяза­тельства скорее исключение в договорной практике, неже­ли обычное явление в отечественном деловом обороте.

Представляется, что использование конструкции аль­тернативного обязательства как обязательства с альтерна­тивно установленной множественностью объекта (пред­мета) исполнения в наибольшей степени отвечает задаче защиты нарушенных прав и законных интересов субъектов гражданского правоотношения.

Иными словами, альтернативное установление объек­та (предмета) исполнения более логично в обязательствен­ных отношениях охранительного характера. Охранитель­ные нормы и возникающие на их основе охранительные правоотношения направлены на восстановление нарушен­ных правонарушением (гражданским проступком) прав потерпевшего. При этом способы восстановления нару­шенного права, равно как и способы возмещения причи­ненного правонарушением вреда могут быть различными. Например, при неисполнении договора поставки креди­тор может быть заинтересован не в получении денежной компенсации за нарушение обязательства, а в оплате вы­полнения соответствующего обязательства в натуре тре­тьим лицом. Или при повреждении вещи для ее собствен­ника не представляет интереса ремонт испорченной вещи, а необходимо предоставление новой аналогичной вещи. Также возможно, что его интерес не будет удовлетворен предоставлением денежной суммы, равнозначной повреж­денной вещи. И логично, если определение способа восста­новления нарушенного права будет принадлежать потер­певшему — кредитору в охранительном правоотношении.

Представляется, что предоставление права выбора надлежащего удовлетворения по охранительному обяза­тельству пострадавшей стороне — кредитору наиболее пол­но отвечает целям защиты и восстановления прав и закон­ных интересов участников гражданских правоотношений.

Например, в охранительном правоотношении в свя­зи с причинением вреда здоровью обязанность должника может быть сформулирована альтернативно: обеспечить оказание соответствующей медицинской помощи по­страдавшему, включая медикаментозное обеспечение, амбулаторное и стационарное лечение и реабилитацион­ные мероприятия, или оплатить соответствующие услуги выбранного медицинского учреждения либо выплатить установленную денежную компенсацию. Альтернативное обязательство такого содержания возможно, если вред здо­ровью причинен действиями медицинского учреждения и оно может своими силами устранить причиненный вред, или предоставить соответствующие услуги другого меди­цинского учреждения по заключенному с ним договору, или же выплатить денежную сумму.

 

Аналогичное установление альтернативной множе­ственности предмета (объекта) обязательства, возникаю­щего в связи с причинением вреда имуществу, позволит максимально соблюсти интересы пострадавшей стороны: причинитель вреда — должник по выбору кредитора обя­зан либо починить испорченное имущество, либо оплатить ремонт этого имущества, либо предоставить имущество, аналогичное испорченному (того же вида, рода, качества и количества), либо выплатить соответствующую денежную сумму.

То же можно сказать и относительно неисполнения (ненадлежащего исполнения) обязательств. Должник по охранительному обязательству обязуется либо устранить ненадлежащее исполнение и осуществить его надлежащим образом, либо обеспечить исполнение этого обязательства в натуре третьим лицом (при этом возможно возложение обязанности по поиску исполнителя на должника), либо выплатить денежную компенсацию.

Еще раз подчеркнем: не всегда даже в условиях ры­ночной экономики выплата денежной компенсации за причиненный правонарушением вред соответствует инте­ресам пострадавшей стороны и восстанавливает нарушен­ное право. Поэтому установление объекта охранительного обязательства, предусматривающего альтернативу денеж­ному возмещению ущерба, в полной мере соответствует интересам пострадавшей стороны при условии наделения ее правом выбора объекта (предмета) надлежащего ис­полнения охранительного обязательства. В таком случае у пострадавшего всегда будет возможность выбора между денежной компенсацией и иным способом восстановления его нарушенного права.

Таким образом, защита интересов потерпевшего от гражданского правонарушения в максимальной степени достигается при использовании конструкции альтернатив­ного обязательства, предусматривающего наделение пра­вом выбора надлежащего объекта (предмета) исполнения охранительного обязательства кредитора — пострадавшей стороны.

Поскольку охранительные правоотношения в боль­шинстве своем возникают на основе законодательно уста­новленных норм, представляется целесообразным госу­дарству чаще использовать конструкцию альтернативного обязательства для установления обязанностей причини­теля вреда. Впрочем, высказанное мнение в полной мере применимо и для охранительных правоотношений, возни­кающих на основе договорных охранительных норм.

 

 

Статья опубликована в Евразийском юридическом журнале № 2 (21) 2010

< предыдущая		следующая >

О функциях правового регулирования Текст научной статьи по специальности «Право»

О ФУНКЦИЯХ ПРАВОВОГО РЕГУЛИРОВАНИЯ

ЛОШАКОВА Светлана Анатольевна

Аннотация: в системе российского права в настоящее время происходят существенные качественные изменения. Создается новый правовой порядок, стимулирующий переход России к обществу с рыночной экономикой и правовому государству. Стало очевидным, что современное право должно выполнять функции одного из самых эффективных средств в деле осуществления государством власти в интересах народа.

Annotation: in the system of Russian ¡aw currently experiencing significant qualitative changes are held. It is created a new legal order, stimulating Russia’s transition to a society with a market economy and rule of ¡aw. It became obvious that the current law should serve as one of the most effective means to implement the state government for the people.

Ключевые слова: государство, право, функция права, регулятивная функция, охранительная функция, гражданское право.

Key words: state law, the function of law, regulatory function, protective function, Civil Law

Понятие «функции права» наиболее полно разработано в общетеоретической и отраслевых правовых науках. Функции характеризуют назначение права для общественных отношений, но их суть и методологическая ценность состоят в том, что представляют собой правовое воздействие на общественные отношения в определенных направлениях. Т.Н. Радько отмечает, что функция права — это такое направление его воздействия на общественные отношения, потребность в осуществлении которого порождает необходимость существования права как социального явления. В этом смысле можно сказать, что функция характеризует направление необходимого воздействия права, т.е. такого, без которого общество на данном этапе развития обойтись не может (регулирование, охрана, закрепление определенного вида общественных отношений)1.

Вряд ли целесообразно под функциями права иметь в виду методы воздействия права на общественные отношения. Именно в таком ключе ряд авторов дает следующее определение: функции права — это основные пути (каналы) правового воздействия, выражающие роль права в упорядочении общественных отношений2. Как известно, методы правового воздействия призваны обеспечивать реализацию функций права. Методы и функции, хотя и взаимосвязаны, но их все-таки следует различать в тех случаях, когда речь идет о понятии и сущности указанных правовых явлений. Здесь надо иметь в виду, что функция не собственно юридическое понятие. Оно заимствовано из физико-математических

1 См.: Теория государства и права: Учебник / Под ред. В.Я. Кикотя,

В.В. Лазарева. 3-е изд., перераб. и доп. М., 2008. С. 295.

2 См.: Матузов Н.И., Малько А.В. Теория государства и права. Учебник. М., 209. С. 172.

наук3. Все же в большинстве случаев с функцией связывается направление, избирательное воздействие какой-либо системы на определенные стороны внешней среды4.

Если же говорить по существу, то надо вспомнить, что в гражданском праве существуют понятия двух типов: первый тип понятий выражает закрепленные государством типовые имущественные и связанные с ними неимущественные отношения, т.е. материально-правовые отношения. К такому типу понятий относится, в частности, понятие «функция права». Второй тип правовых понятий выражает некоторые стороны самого закрепления отношений — они фиксируют в общей форме различные методы и способы воздействия государства на имущественные и иные отношения. Эти понятия образуются, главным образом, по характеру (методу) правового регулирования5. Нетрудно заметить, что понятия «функция» и «метод» разнотипные понятия. Их нельзя смешивать, ибо в противном случае нарушаются логические пределы понятий, искажается их сущность.

Общетеоретическое определение «функции права» требует конкретизации применительно к отраслевым функциям с учетом специфики социального назначения каждой отрасли права. Применительно к гражданскому праву следует исходить из двух обстоятельств. Во-первых, из предмета регулирования: имущественных и связанных с ними неимущественных отношений. Речь идет об основных повседневных, нормальных,

3 См. : Венгеров А.Б. Теория государства и права. Учебник. М., 2009. С. 169.

4 См.: Кашанина Т.В. Частное право. Учебник. М., 2009. С. 102.

5 См.: Аскназий С.И. Основные вопросы теории социалистического гражданского права. М.: Статут, 2008. С. 91.

4

Юридическая наука. 2011. № 1

желаемых, развивающихся отношениях граждан и организаций6; о конкретных жизненных отношениях, приобретающих массовый и повторный характер7. Предмет регулирования обуславливает особенности функций гражданского права и его социально-экономическое назначение по признанию, осуществлению и защите потребностей, прав и интересов в сфере имущественных и некоторых неимущественных отношений всех его участников8. Что характерно, последние самостоятельно организуют свою деятельность с целью достижения указанных результатов. Поэтому особенность регулятивной функции гражданского права состоит в предоставлении субъектам возможностей их самоорганизации и саморегулирования9.

Специфика социального назначения гражданского права обусловлена, во-вторых, задачами, стоящими перед государством и, следовательно, с функциями государства, особенно с его внутренними функциями10. Так, в период экономического спада, а тем более экономического кризиса, когда решаются задачи стабилизации экономики и ее подъема, на первом плане оказываются экономические функции11 . Экономическая функция современного государства имеет антикризисную направленность и нацелена на создание социально ориентированной рыночной экономики, учитывающей и согласовывающей интересы производителей и потребителей. Неотъемлемой частью экономической функции государства является охрана существующих форм собственности — экономического фундамента любого государства12. С экономической функцией государства тесно и органично связаны функции государственной собственности. Реализация экономической функции государства невозможна без осуществления правомочий публичного собственника (Российской Федерации и ее субъектов). Исходя из этого, к функциям государственной собственности обоснованно относят: перераспределительную функцию, с

6 Тархов В.А. Избранные труды. М.: ИГ «Юрист», 2008. С. 342.

7 См.: Гримм Д. Соотношение между юридическими институтами и конкретными отношениями // С борник статей по гражданскому и торговому праву. Памяти профессора Г абриэля Феликсовича Шершеневича. М.: Статут,

2005. С. 303-323

8 См.: Яковлев В.Ф. Экономика. Право. Суд. М., 2003. С. 43; Калмыков Ю.Х. О значении общих положений гражданского законодательства / Избранное: Труды. Статьи. Выступление. М., 1998. С. 261-273.

9 См. : Гражданское право: В 4 т. Том 1. Общая часть: Учебник / Отв. ред. проф. Е.А. Суханов. М., 2004. С. 48.

10 В историческом плане небезынтересно отметить, что процесс обособления гражданского права от публичного шел параллельно с усилением государственной власти и сосредоточением в ее руках функций публичного права (см. подробно: Гамбаров Ю.С. Гражданское право. Общая часть / под ред. В.А.Томсинова. — М., 2003. С. 46-59, 65-75.

11 См.: Марченко М.Н. Теория государства и права. Элементарный курс. М., 2009. С. 219.

12 См.: Теория государства и права. Учебник / Отв. ред. В.Д. Перевалов. М.,

2009. С. 74-75.

помощью которой происходит накопление денежных средств и их использование в целях удовлетворения общегосударственных нужд; функцию капитализации, которая реализуется при поступлении в госсобственность ценных бумаг, а также посредством внесения вкладов в уставные капиталы хозяйственных обществ; социальную функцию и функцию организационно-управленческую13 .

Широко распространено деление функций права на регулятивные и охранительные14. Однако трудно согласиться с предлагаемым делением, потому что «правовая охрана в значительной мере заключается именно в надлежащем правовом регулировании, а регулятивная функция не может быть осуществлена без охраны»15. Не согласна с указанной классификацией и СТ. Максименко, считающая неудачным название функции регулятивной (регулирующей). Она предлагает назвать эту функцию права функцией организации и преобразования общественных отношений, поскольку наименование функции «регулятивная» ничего не добавляет к понятию правового регулирования, а лишь вносит путаницу. По ее справедливому мнению, выделение регулирующей функции права смешивает понятие всего правового регулирования с отдельными его направлениями -функциями права. Поэтому логично утверждать, что регулирование общественных отношений, как общесоциальная функция права, конкретно выражается в функции организации и преобразования общественных отношений, в функции охраны общественных отношений и в воспитательной функции16 .

Нет спора — право является регулятором общественных отношений, и в этом смысле все функции его регулятивные, т.е. правовое воздействие на общественные отношения происходит только в рамках эффективного правового регулирования17 .

Между тем А.Я. Рыженков разграничивает их по следующему критерию: если регулирование происходит с помощью установления юридических прав и обязанностей, то воздействие права на общественные отношения не исчерпывается этой

13 См.: Соловьев В.Н. К вопросу о функциях государственной собственности и их правовом регулировании. // Законы России: Опыт, анализ, практика. 2009. № 4. С. 174-175; Горазеев Н.Г Государственная корпорация: собственность, право собственности, управление собственностью // Законы России: Опыт, анализ, практика. 2009. № 4. С. 29-31; Мозолин В.П. Правовой статус государственной корпорации и юридическая природа права со бственности на принадлежащее ей имущество / / Журнал российского права. 2009. № 1.

14 См., например: Рассказов Л.П. Теория государства и права: Учебник для вузов. 2-е изд. М., 2009. С. 224-226.

15 См.: Тархов В.А. Указ. соч. С. 342.

16 См.: Максименко С.Т. Функции советского гражданского права // Актуальные вопросы советской юридической науки. Саратов, 1973. Часть 2.

С. 6-7.

17 См.: Варламова Н.В. Эффективность правового регулирования: переосмысление концепции // Правоведение. 2009. № 1. С. 212-232.

формой, оно охватывает также общее стимулирующее и мотивационное влияние (посредством правосознания, правотворчества, законности и т.д.). Далее отмечается, что функции и регулируют общественные отношения и оказывают общее воздействие на них. Такое понимание активности функций права открывает перспективу для решения ряда вопросов, в частности, улучшается возможность «четко отграничить собственно юридические функции права от иных его функций, сущность которых заключается в воздействии (но не регулировании) на общественные отношения (например, от воспитательной функции права)»18.

В литературе можно встретить утверждение о существовании регулятивной, охранительной и социальной функций субъективного гражданского права. Причем, регулятивная функция субъективного гражданского права определяется как основное направление его воздействия на имущественные и личные неимущественные сферы общественных отношений, регулируемых объективным гражданским правом, состоящие в определении возможного и должного поведения участников гражданско-правовых отношений19. На наш взгляд, здесь допускается методологический просчет, в конечном счете связанный с отождествлением права и правоотношения и с искажением функционального аспекта механизма гражданско-правового регулирования. В той же мере, в какой необходимо различать объективное и субъективное право, нужно проводить различие между объективным правом и правовыми отношениями, элементами которых являются субъективные права20 . В этой связи недопустимо регулятивную функцию объективного гражданского права «приписывать» субъективному праву.

Субъективное гражданское право — составная часть механизма гражданско-правового регулирования и, самое важное, начальный этап процесса реализации функций гражданского права21 . Субъективное право само выступает средством реализации регулятивной функции права.

Специфика функций гражданско-правового регулирования проявляется в особенностях структурно-функциональных связей основных и вспомогательных элементов юридического содержания гражданского права22 , а также в особенностях функций основных отраслевых институтов, например, права собственности, обязательственного права, гражданско-правовой ответственности.

Главное свойство правовых норм — их обязательность. Этим их содержание принципиально отличается от содержания, например, правовых памятников или иностранных нормативных актов, воспринимаемых гражданином только литературно. Действие права, в том числе воспитательного характера, может происходить только в определенных правовых отношениях, а не иначе. Здесь следует помнить, что право является лишь одним из элементов общечеловеческой культуры. На это обстоятельство обращал внимание Иосиф Алексеевич Покровский, исследуя исторические корни гражданского права23.

Таким образом, нормы гражданского права оказывают вполне конкретное воспитательное воздействие на сознание и поведение граждан в возникающих гражданско-правовых отношениях, в рамках осуществления воспитательной функции гражданско-правового регулирования. Причем одновременно необходима воспитательная деятельность по повышению правосознания и формированию гражданско-правовой активности.

18 См.: Рыженков А.Я. Компенсационная функция советского гражданского права. Саратов, 1983. С. 10-11.

19 См.: Мичурина Л.В. Субъективное право в системе юридических средств гражданско-правового регулирования (структурно-функциональный анализ). М., 2004. С. 19.

20 См.: Тархов В.А. Указ. соч. С. 260.

21 См.: Абрамов А.И. Понятие реализации функций права. Соотношение понятий «реализация права» и «реализация функций права» // Правоведение.

2006. № 3. С. 188; Рузанова В.Д. Основная дифференциация субъективных гражданских прав: принцип и критерий // Принципы и критерии дифференциации субъективных прав в частноправовой сфере. Сборник научн. статей. Самара, 2009. С. 4-14.

22 См.: Арзуманян А.В. Содержание гражданского права. М., 2004. С. 16.

23 См.: Покровский И.А. Основные проблемы гражданского права. М., Статут (в серии «Классика российской цивилистики»), 1998. С. 49-59. См. также: Блинков О.Е. Общие тенденции развития наследственного права государств — участников Содружества независимых государств и Балтии. Автореф. дисс. … доктора юрид. наук. М., 2009. С. 3.

2.3. Взаимодействие охранительной функции права с регулятивной функцией права

В реальной жизни функции права не существуют изолированно друг от друга, они тесно взаимосвязаны между собой. Ни одна из них не может быть изучена достаточно глубоко и полно без выяснения ее взаимодействия с другими функциями, т.е. без того, чтобы изучить ее в системе. Регулятивная и охранительная функции — это имманентные праву функции. Это те функции, которые как раз и характеризуют право как специфическое качественно самостоятельное образование. Более того, можно сказать, что необходимость существования права как социального явления состоит в необходимости осуществления им этих функций.

Взаимодействие этих функций выражается в следующем:

1) регулятивная функция первична по отношению к охранительной функции этой отрасли права;

2) возможность осуществления охранительной функции обеспечивается посредством регулятивно-статического воздействия права;

3) охранительная и регулятивная функции права обладают единым объектом воздействия;

4) возникновение под охранительным воздействием нового правоотношения не означает прекращение регулятивного правоотношения, т. к. охранительное правоотношение нацелено либо на охрану (гарантированность, обеспечение) регулятивного правоотношения, либо на приведение его в прежнее нормальное состояние;

5) действенность регулятивных норм обеспечивается нормами охранительными.

Эффективная реализация регулятивных правовых отношений невозможна без охранительного воздействия этой отрасли права; отдельные регулятивные средства используются для реализации охранительной функции права (например, правовые запреты), что объясняется основным инструментальным предназначением права – быть регулятором общественных отношений.

Например, при изучении охранительной функции уголовного законодательства, помимо роли отрасли, заключающейся в защите охраняемых отношений и выполняемой, в частности, законодательным реагированием на изменения в этих социальных отношениях путем изменения текста или смысла диспозиции Особенной части статьи Уголовного Кодекса Российской Федерации, необходимо обращать внимание на эффективность защиты охраняющих отношений адекватными санкциями.

Направленность уголовного законодательства на охрану общественных отношений, складывающихся в сфере предупреждения преступлений, в последнее время проявилась с принятием законов о предупреждении преступлений и актов о коррекции уголовного законодательства. Так, например, Федеральным законом от 06.04.2011 № 66-ФЗ в УК РФ введена ст. 314.1 «Уклонение от административного надзора», появившаяся одновременно с принятием Федерального закона «Об административном надзоре за лицами, освобожденными из мест лишения свободы» от 06.04.2011 № 64-ФЗ.

Таким образом, функциональная зависимость здесь обнаруживается как в направленности уголовного законодательства на охрану отношений, урегулированных обязывающими и запрещающими предписаниями предупредительной отрасли, так и в изменении текста одной отрасли (уголовной материальной) в связи с изменениями, произошедшими в нормативном материале другой социальной направленности.

Охраняющие отношения в данном случае закрепляются в следующей санкции за деяние, предусмотренное ст. 314.1 УК РФ: обязательные работы на срок от 180 до 240 часов, либо исправительные работы на срок до 2 лет, либо лишение свободы на срок до 1 года. Обращает на себя внимание тот факт, что законодатель по какой-то причине счел нецелесообразным применение к лицам, совершившим данное преступление, наказаний, являющихся более строгими, нежели обязательные и исправительные работы, и менее строгими, чем лишение свободы: ограничения свободы, принудительных работ и ареста.

Функциональные связи в смысле необходимости изменения одних норм ввиду изменения других норм проявились в следующем случае.

Законодатель структурно не разделил предписания предупредительного характера и оперативные предписания об изменении уголовного законодательства, поместив в одном акте положения, с одной стороны, регулирующие профилактическое противодействие неправомерному использованию инсайдерской информации и манипулированию рынком, а с другой — о коррекции УК РФ и иных актов.

В качестве еще одного примера корреляции законов о предупреждении преступлений и измененного охранительного законодательства можно привести положения Федеральных законов «О противодействии легализации (отмыванию) доходов, полученных преступным путем» от 07.08.2001 № 115-ФЗ и «О внесении изменений и дополнений в законодательные акты РФ в связи с принятием Федерального закона “О противодействии легализации (отмыванию) доходов, полученных преступным путем”» от 07.08.2001 № 121-ФЗ. Сформулированное в законе о предупреждении преступлений понятие легализации (отмывания) доходов, полученных преступным путем, как придания правомерного вида владению, пользованию или распоряжению денежными средствами или иным имуществом, полученными в результате совершения преступления, нашло отражение при формулировании законом от 07.08.2001 № 121-ФЗ цели.

Регулятивная функция права

 /   /   / 

Регулятивная функция права

Регулятивная функция права — как основа упорядочивания общественных отношений

Право как базовый общественный институт стремится упорядочить общественные отношения, создать благоприятные условия для развития, как отдельного человека, так и всего общества. Именно поэтому наиболее важной и главенствующей среди функций права, несомненно, является регулятивная функция. Ведь право испокон веков, начиная от самых архаичных форм (обычаи) до более развитых форм создавалось как эффективный регулятор общественных отношений. Целью существования любого правового института (будь то институт гражданства или договорных отношений) в современном обществе является регулирование общественных отношений. Таким образом, именно регулирование и упорядочивание общественных отношений есть важнейшее социальное предназначение права, его социальная роль.

Что принято понимать под регулятивной функцией права?

Регулятивная функция права есть институт непосредственного воздействия на общественные отношения в целях их упорядочивания и создания условия для развития нормальных общественных отношений.

Признаки и черты регулятивной функции права:

1. В рамках регулятивной функции происходит определение правосубъектности граждан.

2. В рамках регулятивной функции происходит закрепление и изменение правового статуса физических и юридических лиц.

3. В рамках регулятивной функции определяются рамки дозволенного и правомерного поведения.

4. В рамках регулятивной функции происходит формирование связки «права-обязанности» для субъектов правоотношений, устанавливаются правила их правовой связи.

5. В рамках регулятивной функции происходит закрепление юридических фактов, которые направлены на изменение правового статуса лиц.

6. В рамках регулятивной функции происходит закрепление наиболее подходящего типа правового регулирования: общедозволительный (разрешено все, что прямо не запрещено) или разрешительный тип (разрешено только то, что прямо дозволено).

5 УРОВНИ РЕГУЛЯТИВНОЙ ФУНКЦИИ КУЛЬТУРЫ. Культурология. Шпаргалка [litres]

Читайте также

2.2.7 Уровни восприятия «своих» и «чужих»

2.2.7 Уровни восприятия «своих» и «чужих» В качестве обобщения анализа восприятия «своих» и «чужих» в социальной практике древнерусского (эпического) социума можно привести основные параметры принадлежности к «своим» на основании материалов былин.Для выражения тех или

2.1. Уровни методологии структурно-функционального подхода

2.1. Уровни методологии структурно-функционального подхода Вычленение методологического аспекта в структурно-функциональном подходе представляет собой особую науковедческую задачу. При всех различиях научного мышления Малиновского и Рэдклифф-Брауна теоретические

ГЛАВА ТРЕТЬЯ.

ЭЛЕМЕНТЫ И УРОВНИ КИНОЯЗЫКА

ГЛАВА ТРЕТЬЯ. ЭЛЕМЕНТЫ И УРОВНИ КИНОЯЗЫКА Великий швейцарский лингвист, основоположник структурной лингвистики Фердинанд де Соссюр, опре-деляя сущность языковых механизмов, сказал: «В языке все сводится к различиям, но также все сводится к сочетаниям».Обнаружение и

3.4. Функции культуры

3.4. Функции культуры Сложность, многообразие проявлений культуры, ее многомерность определяют и многообразие ее функций. Культура полифункциональна.«Функции культуры – это совокупность ролей, которые выполняет культура по отношению к сообществу людей» [6]. В науке нет

II. УРОВНИ НАШЕГО «Я»

II. УРОВНИ НАШЕГО «Я» «Мы… Но кто же это «мы»?» (IV 4, 14, 16) «Плотин стыдился, что у него есть тело» (Жизнь Пл. 1, 1). Именно так Порфирий начинает рассказ о жизни своего учителя. Не будем спешить с диагнозом, приписывая нашему философу какую?нибудь патологию. Если здесь и имеет

4 ФУНКЦИИ КУЛЬТУРЫ

4 ФУНКЦИИ КУЛЬТУРЫ Термин «функция» (от лат. functio – «исполнение») переводится как «обязанность», «круг деятельности».Определяющей функцией культуры является гуманистическая, или воспитательная, духовно—нравственная. Суть ее отражает понятие «культура души». От этой

Уровни культурологической типологии

Уровни культурологической типологии 1. Системная типология мировой культуры.1.1. Культура как система в концепции Л. Уайта.1.2. Концепция мир-системы И. Валлерстайна.1.3. Триадосубстанциональная система мировой культуры Ю. В. Осокина1.4. И.М. Дьяконов об эволюции мировой

ЛЕКЦИЯ № 5. Язык культуры и ее функции

ЛЕКЦИЯ № 5. Язык культуры и ее функции 1. Понятие языка культуры Языком культуры в широком смысле этого понятия называют те средства, знаки, формы, символы, тексты, которые позволяют людям вступать в коммуникативные связи друг с другом. Язык культуры – это универсальная

3. Основные функции культуры

3. Основные функции культуры Главная функция феномена культуры – человекотворческая или гуманистическая. Все остальные так или иначе связаны с ней и даже вытекают из нее.Функцию трансляции (передачи) социального опыта нередко называют функцией исторической

3.

3. Уровни культуры и культурности

3.3. Уровни культуры и культурности В современной научной литературе еще не завершилась дискуссия о том, по каким основаниям определять понятие «культура». Это зависит от избранного ученым теоретико–методологического подхода к определению понятия. Если культуру

Предмет теории культуры, культура и цивилизация, функции культуры

Предмет теории культуры, культура и цивилизация, функции культуры Арсеньев Н. С. О смысле культуры // Русские философы. Антология. М., 1993.Артановский С. Н. Культура как мудрость. СПб., 2000.Бабушкин С. А. Теория цивилизаций. Курск, 1997.Белик А. А. Культурология. Антропологические

9. Значение и функции культуры

9.  Значение и функции культуры Значение культуры в нашем мире огромно. Она играет первую роль в развитии общества. Рассмотрим основные функции культуры, ее феномена.1. Человеко – творческая функция. Она стоит во главе. Другое ее название – гуманистическая. Все

5. Значение и функции культуры

5. Значение и функции культуры Значение культуры в нашем мире огромно. Она играет первую роль в развитии общества. Рассмотрим основные функции культуры, ее феномена.1. Человеко-творческая функция. Она стоит во главе. Другое ее название – гуманистическая. Все

ТЕМА 2 Виды, формы, содержание и функции культуры

ТЕМА 2 Виды, формы, содержание и функции культуры Выше мы отметили: культура – это явление человека в истории, вид его бытия в мире, способ его жизнедеятельности, самоосуществления, присущего только человеку. Животный мир ничего не выражает, кроме своей природной данности.

Интертекстуальная ирония и уровни чтения[101]

Интертекстуальная ирония и уровни чтения[101] Прошу прощения, если среди прочих примеров я процитирую и собственные произведения. Разберу некоторые аспекты так называемой постмодернистской прозы, ведь ряд критиков и литературоведов, в частности Брайан Макхейл, Линда

Регулирующая функция — обзор

3.2 Роль взгляда во взаимодействии

Наши глаза позволяют нам воспринимать нашу визуальную среду. Это основная функция взгляда, и все остальные вытекают из нее. Рассматривая роль направления взгляда в социальном взаимодействии, когда взаимодействующие лица осознают фокус внимания друг друга, Кендон [9] выделяет три основных типа функций: контролирующую, выразительную и регулирующую.

[Мы] должны предложить некоторые предложения относительно функции направления взгляда, как в качестве акта восприятия, с помощью которого один взаимодействующий может контролировать поведение другого, так и в качестве выразительного знака и регулирующего сигнала, с помощью которого он может влиять на поведение другого.

Эти функции явно взаимосвязаны, а регулирующая функция, по-видимому, опирается на другие. Рассмотрим, например, следующие две регулирующие функции, взятые у Кендона:

▪

Отведя взгляд, говорящий может сигнализировать о своем намерении продолжать удерживать слово, что может помешать адресату перебивать.

▪

Прерывистые взгляды говорящего на слушателя используются, чтобы проверить, как получено сообщение, и вызвать реакцию.

Во втором случае, например, мониторинг говорящего работает двояко: во-первых, он сигнализирует слушателю; второй — по обычным правилам взаимодействия — для регулирования интерактивного поведения.

Мы начали с того, что основной функцией взгляда является визуальное восприятие, что переводится как «наблюдение» за собеседником в разговорной обстановке. Тот факт, что он может выполнять регулирующую функцию, проистекает из этого, поскольку мониторинг будет интерпретироваться собеседником как произвольный и, следовательно, будет служить для обозначения некоторого преднамеренного состояния.Такие состояния могут быть самыми разнообразными. Взгляд играет роль в идентификации адресата, во внимательности отображения, в выполнении переходов между очередями и в запросах на обратный канал [10–13]. Типичные образцы взгляда возникают при поиске слова или при размышлении. Поведение взгляда может также отражать социальный статус участников. Взгляд в сторону часто используется, чтобы не отвлекаться, сосредоточиться или указать на желание не отвлекаться. Было сказано, что человек смотрит на другого человека, чтобы получить сигналы о настроении и расположении, а также установить или поддерживать социальный контакт, поэтому взгляд в сторону может отражать колебания, смущение или застенчивость. Взгляд также можно использовать для размещения референтов в абстрактном пространстве [14, 15].

Взор может использоваться для ряда функций, которые основаны на восприятии и знании того, что его можно использовать в качестве сигнала, но очевидно, что помимо полезности существует множество факторов, которые определяют поведение взгляда. Обстановка, тип разговора, отношения между людьми (близость, роль), физическое состояние (усталость), когнитивная нагрузка, эмоциональное состояние [16–17], личность [19], социальные нормы, пол [20] — все это влияет на поведение взгляда.Обзор этих факторов см. В [21, 22].

Некоторые из перечисленных факторов могут быть частью сознательных усилий смотрящего. Например, можно сознательно смотреть на объект и указывать на него, когда о нем говорят. Здесь взгляд используется как коммуникативный сигнал, очень похожий на дейктическое местоимение или указательный жест рукой или рукой. Другие модели взгляда могли быть усвоены, а затем стали автоматическими — например, не пристально смотреть на человека слишком долго, потому что это нарушает социальное правило. Третьи находятся ниже уровня осознания и приходят естественным образом. Некоторыми из них нельзя управлять, например, рефлекторным закрытием глаз.

С точки зрения наблюдателя поведение взгляда может быть истолковано другими как указание на факторы, которые их вызывают или, по крайней мере, совместно определяют их. Таким образом, поведение становится сигналом, из которого можно вывести ряд интерпретаций психического состояния смотрящего [23, 24]. Одна из задач для автоматизированных систем — разработать аналогичные возможности чтения мыслей.

До сих пор презентация была сосредоточена больше на функциях взгляда и меньше на том, что составляет поведение взгляда. Хотя Кендон обсуждал только направление взгляда в приведенных выше примерах, это не означает, что направление как таковое является единственным параметром, который необходимо учитывать. Еще один параметр, который Кендон принял во внимание в своем анализе, — это продолжительность взгляда, которая, например, обычно различается между говорящими и слушателями.

В той мере, в какой можно говорить о типичной схеме, это выглядит так: во время прослушивания p смотрит на q с довольно длинными q -газами ¹ … прервано очень коротким a -взгляды, в то время как во время разговора он чередует взгляды q — и a более равной длины, причем a -взгляды длиннее, чем те, которые возникают во время прослушивания.(стр. 27)

Направление и продолжительность взгляда — не единственные информативные параметры, отображающие типичные шаблоны. В своем исследовании связи между поведением взгляда и управлением впечатлением Фукуяма и др. [25] учитывали количество взгляда, среднюю продолжительность взгляда и количество точек взгляда в отведенном положении. Систематически изменяя эти параметры в своем агенте «только глаза», они показали, как могут быть созданы разные впечатления. Рассматривая различные параметры, связанные с взглядом, Погги [26] пошел еще дальше. Для анализа и интерпретации взгляда она считала важными брови и веки. Веки, например, могут мигать или хлопать, вибрировать или частично закрываться. Кроме того, что касается глаз, она приняла во внимание такие аспекты, как положение, направление, влажность, фокусировка и расширение зрачка. «Язык глаз» не является независимым от других выразительных частей лица или движений головы, как показывают выразительные лица на рис. 3.1.

Рисунок 3.1. Выразительные функции взора.

Множество факторов, влияющих на определение того, куда и как люди смотрят, делают взгляд богатым источником для определения психических состояний. Однако они также усложняют такие выводы, потому что всегда необходимо учитывать множество смешивающих переменных. Рассмотрим, например, продолжительность, когда долгий пристальный взгляд может быть одновременно устрашающим и интимным.

Автоматическое определение того, куда смотрит человек, измерение количества взгляда и других функций — это одна из проблем, с которыми сталкиваются интерфейсы, поддерживающие взгляд. Более сложная задача для них — интерпретировать поведение взгляда и обеспечить соответствующую реакцию. В следующем разделе мы обсудим несколько способов, которыми взгляд использовался в качестве устройства ввода или где он использовался для вывода информации из человеческих взаимодействий.

5 Роль регулирующего агентства | Более сильные системы регулирования пищевых продуктов и медикаментов за рубежом

Чахал, Х. С., Ф. Кашфипур, М. Суско, Н. С. Фичем и К. Бойл. 2016. Создание модели регуляторной цепочки создания стоимости: инновационный подход к укреплению систем регулирования лекарственных средств в условиях ограниченных ресурсов. Revista Panamericana de Salud P ú blica 39 (5): 299–305.

Чакраборти, С., и Р. Лофстедт. 2012. Инициатива по обеспечению прозрачности Центром оценки и исследований лекарственных средств (CDER) Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов: два качественных исследования общественного мнения. Европейский журнал регулирования рисков 3 (1): 57–71.

Чалкер, Дж. К., К. Виалле-Валентин, Дж. Лиана, Р. Мбваси, И. А. Семали, Б. Кихийо, Э. Шекалаг, А. Диллип, С. Киматта, Р. Валимба, М. Эмбри, Р. Либер, Э.Рутта, К. Джонсон и Д. Росс-Дегнан. 2015. Какую роль аккредитованные точки продажи лекарств в Танзании играют в облегчении доступа к противомикробным препаратам? Результаты многометодного анализа. Устойчивость к противомикробным препаратам и инфекционный контроль 4 (1): 33.

Charbit, C. и M. Muichalun. 2009. Помните о пробелах: Управление взаимозависимостью в отношениях между уровнями правительства. Рабочие документы ОЭСР по государственному управлению № 14. Париж, Франция: ОЭСР.

Cheah, P. Y.2019.Учреждения должны изложить политику в отношении обмена данными. Nature International Journal of Science 565.

Чинвенду, О. 2008. Борьба NAFDAC с поддельными лекарствами в Нигерии . Документ представлен на 44-м Международном курсе развития здравоохранения (ICHD), 24 сентября 2007 г. — 12 сентября 2008 г., Амстердам, Нидерланды.

Чоудхури, Н., П. Джоши, А. Патнаик и Б. Сарасвати. 2015. Административная структура и функции органов регулирования лекарственных средств в Индии .Рабочий документ. Нью-Дели, Индия: Индийский совет по исследованиям в области международных экономических отношений.

Д. Кобос Муньос, П. Мерино Амадор, Л. Монсон Ллама, Д. Мартинес Эрнандес и Х. М. Сантос Санчо. 2017. Децентрализация систем здравоохранения в странах с низким и средним уровнем дохода: систематический обзор. Международный журнал общественного здравоохранения 62 (2): 219–229.

Купер, Л. В., А. Робсон, К. Л. Троттер, А. Асеффа, Дж. М. Коллард, Д. М. Даугла, А. Диалло, А. Ходжсон, Дж.Ф. Джусот, Б. Омотара, С. Соу, М. Хассан-Кинг, О. Манигарт, М. Насименто, А. Вокеу, Д. Чандрамохан, Р. Бэрроу, М. Дж. Мэйден, Б. Гринвуд, Дж. М. Стюарт и К. . MenAfriCar. 2019. Факторы риска приобретения менингококкового носительства в африканском поясе менингита. Тропическая медицина и международное здравоохранение 24 (4): 392–400.

Curristine, T., Z. Lonti, and I. Joumard. 2007. Повышение эффективности государственного сектора. Журнал ОЭСР по бюджетированию 7 (1): 1–41.

Даугла, д.M., JP Gami, K. Gamougam, N. Naibei, L. Mbainadji, M. Narbe, J. Toralta, B. Kodbesse, C. Ngadoua, ME Coldiron, F. Fermon, AL Page, MH Djingarey, S. Hugonnet , OB Harrison, LS Rebbetts, Y. Tekletsion, ER Watkins, D. Hill, DA Caugant, D. Chandramohan, M. Hassan-King, O. Manigart, M. Nascimento, A. Woukeu, C. Trotter, JM Stuart, М. Мэйден и Б.М. Гринвуд. 2014. Влияние конъюгированной менингококковой вакцины серогруппы A (PSA-TT) на менингококковый менингит серогруппы A и носительство в Чаде: исследование сообщества [исправлено]. Ланцет 383 (9911): 40–47.

Де Гроот, Х., К. Наррод, С. К. Кименью, К. Бетт, Р. П. Б. Скотт, М. М. Тионгко и З. М. Гитонга. 2016. Измерение готовности сельских потребителей платить за знаки качества с помощью экспериментальных аукционов: пример кукурузы без афлатоксина в Кении. Экономика сельского хозяйства 47 (1): 33–45.

Дулли, Л. 2019. Мобильные технологии для вмешательств в области сексуального и репродуктивного здоровья в странах с низким и средним уровнем доходов. Американский журнал общественного здравоохранения 109 (6): 836–837.

EDCTP (Партнерство по клиническим исследованиям в Европе и развивающихся странах). нет данных Дом . http://www.edctp.org (по состоянию на 22 октября 2019 г.).

Центр знаний EDCTP. нет данных Набор инструментов для обмена данными . https://edctpknowledgehub.tghn.org/data-sharing-toolkit (по состоянию на 22 октября 2019 г. ).

Нормативные функции и разработки третьих сторон

Осуществление регулирующих функций НОАК, предоставление комментариев по предложениям третьих сторон по развитию и вклад в вопросы местной и национальной политики — все это дает возможность положительно влиять на защиту окружающей среды реки, включая биоразнообразие.В этой таблице указаны основные способы, которыми НОАК может оказывать такое влияние, с разбивкой по департаментам или секциям.

ОКРУЖАЮЩАЯ СРЕДА

Рассмотрение заявок на сторонние капитальные и ремонтные дноуглубительные работы и утверждение лицензий

Контроль и выдача разрешений на использование береговой линии

Регулирующая функция — участие планировщиков и регулирующих органов по вопросам режима реки и окружающей среды

Функция разработки — взаимодействие с разработчиками крупных проектов по вопросам режима и окружающей среды

Регулирующая функция — участие планировщиков и регулирующих органов по вопросам окружающей среды на суше

Функция разработки — взаимодействие с разработчиками крупных проектов по вопросам земной окружающей среды

ПЛАНИРОВАНИЕ И ПАРТНЕРСТВО

Контроль за разработкой — внештатный консультант для планирования приложений и связанных процессов и предоставления консультаций по ним

Советник мэра Лондона по всем речным вопросам

Влияние на разработку политики на местном и национальном уровне

HARBOR MASTERS

Лицензирование River Works

Вопросы безопасности мореплавания

Входные данные для сторонних капитальных и ремонтных дноуглубительных работ

МОРСКАЯ БЕЗОПАСНОСТЬ И УПРАВЛЕНИЕ В ЧРЕЗВЫЧАЙНЫХ СИТУАЦИЯХ

Система управления безопасностью судоходства

Управление непредвиденными обстоятельствами

Лицензирование судна

ГРАЖДАНСКАЯ ТЕХНИКА

Вклад в лицензирование River Works и предоставление консультаций третьим сторонам

Вернуться к индексу CMF

Возврат к воздействиям на биоразнообразие

Регуляторные функции нервной системы на примере спинномоторной системы

Часть Springer Study Edition серия книг (SSE)

Abstract

Многие функции живых организмов — это регулирующие процессы. — определенное состояние, характеризуемое измеримой величиной, остается постоянным.Примерами являются регулирование температуры тела, кровяного давления и положения тела в гравитационном поле. Во многих случаях регуляции нервная система играет центральную роль.

Ключевые слова

Схема контроля длины мышцы Рефлекс растяжения Незатухающие колебания Разряд мотонейрона

Эти ключевые слова были добавлены машиной, а не авторами. Это экспериментальный процесс, и ключевые слова могут обновляться по мере улучшения алгоритма обучения.

Это предварительный просмотр содержимого подписки,

войдите в

, чтобы проверить доступ.

Предварительный просмотр

Невозможно отобразить предварительный просмотр. Скачать превью PDF.

Общая литература

1. Гранит, Р .: Основы управления двигателем. Лондон, Нью-Йорк: Academic Press 1970.

   Google Scholar

2. Гродинс, Ф. С .: Теория управления и биологические системы. Нью-Йорк: Columbia University Press, 1963.

   Google Scholar

3. Homma, S. (Ed.): Понимание рефлекса растяжения. Прогр. Brain Res.

   44

   , (1976).

   Google Scholar

4. Houk, J .: Управление мышцами с обратной связью: синтез периферических механизмов. В кн .: Медицинская физиология. 13-е изд. Vol. 1 (Под ред. В. Б. Маунткасла), с. 668. Сент-Луис: Компания К. В. Мосби, 1974.

   Google Scholar,
,
5. ,

   , Мэтьюз, П. Б. К .: Мышечные рецепторы млекопитающих и их центральные действия. Лондон: Арнольд 1972.

   Google Scholar

6. Смит, Дж. М .: Математические идеи в биологии. Кембридж и Нью-Йорк: Издательство Кембриджского университета 1968.

   CrossRefGoogle Scholar

7. Винер, Н .: Кибернетика. Париж, Нью-Йорк: Freymann, 1948.

   Google Scholar

Информация об авторских правах

© Springer Science + Business Media New York 1978

Авторы и аффилированные лица

Нет доступных филиалов

NPY обеспечивает быстрое питание и регулирование метаболизма глюкозы функции нейронов AgRP

Уход за животными

Все эксперименты соответствовали всем применимым этическим нормам для испытаний и исследований на животных. Все процедуры с животными проводились в соответствии с протоколами, утвержденными местными властями (Bezirksregierung Köln). Мышей помещали в группы (3–5 животных в клетке) в контролируемой среде с точки зрения влажности и температуры (22–24 ^o ° C) с циклом 12 часов света / 12 часов темноты. Мышей, предназначенных для экспериментов с голоданием и повторным кормлением, непрямой калориметрии и для оптогенетики (после операции), содержали в одном помещении. Мыши имели неограниченный доступ к воде и стандартному корму для грызунов (ssniff ^® , V1554), если пища не была изъята для конкретного эксперимента.Все эксперименты проводились на взрослых мышах в возрасте 11–19 недель (хемогенетика) или 10–16 недель (оптогенетика). Для хемогенетических экспериментов использовали только мышей-самцов. Для оптогенетических экспериментов использовались оба пола, всегда с учетом надлежащего гендерного баланса для всех генотипов.

Мышиные линии

Все использованные мышиные линии были описаны ранее; AgRP-IRES-cre ¹⁴ , hM3D _Gq ^{фл. / Фл.} (ROSA26CAGSTOPloxSTOPloxhM3DGq; ⁷ , ChR2 ^{фл. / Фл.} (ROSA26CAGSTOPloxSTOPloxSTOPloxSTOPloxChR2 [h249-WP] ^{] / ∆ 13 .Праймеры, используемые для AgRP, были: AgRP1 (GGGCCCTAAGTTGAGTTTTCCT), AgRP2 (GATTACCCAACCTGGGCAGAAC) и AgRP3 (GGGTCGCTACAGACGTTGTTTG). Праймеры, используемые для hM3DGq, были: CAGS_Fow (AAAGTCGCTCTGAGTTGTTATC), CAGS_RevWT (GATATGAAGTACTGGGCTCTT) и CAGS_RevWT (TGTCGCAAATTAACTGTGAATC). Праймеры, используемые для ChR2, были: Ai27-1-F1_5 ‘(AAAGTCGCTCTGAGTTGTTATC), Ai27-1-R1_5’ (GATATGAAGTACTGGGCTCTT) и Ai27-1-R3 (TTACTATGGGAACATACGTCAT). Праймеры, использованные для NPY ∆ / ∆ , были: 12265_Mutant reverse (GGCCTCTTCGCTATTACGC), 23324_Common (ACGGTCGGGGATAGAGAGAG) и 23325_WT Reverse (CAAGTTCACTGGCGTCTGG).}

Получение экспериментальных мышей

Чтобы хемогенетически активировать нейроны AgRP на фоне NPY ^{(вес / вес} ) или NPY ^{∆ / ∆} , мышей AgRP-IRES-Cre скрещивали с мышами hM3DGq ^{fl / fl} , и потомство скрещено с мышами NPY ^{∆ / ∆} . Мышей от этого разведения далее скрещивали с мышами hM3DGq ^{fl / fl} для получения гомозиготности по аллелю hM3DGq. Для создания четырех экспериментальных групп: hM3DGq ^{fl / fl} ; AgRPCre ^{Cre / wt} ; Мышей NPY ^{∆ / wt} скрещивали с hM3DGq ^{fl / fl} ; AgRP-Cre ^{мас. / Мас.} ; NPY ^{∆ / вес} .Мышей для оптогенетических экспериментов получали аналогичным образом путем скрещивания мышей AgRPCre ^{Cre / wt} с мышами ChR2 ^{fl / fl} и впоследствии с линией NPY ^{∆ / ∆} . Полученные четыре экспериментальные группы были гетерозиготными по ChR2. Все линии мышей поддерживали на фоне C57 / Bl6, за исключением мышей с дефицитом NPY, которые находились на фоне 129sv.

Хирургия

Мышей анестезировали изофлураном и делали внутрибрюшинную инъекцию. болюс бупренорфина (0.1 мг / кг массы тела) и помещали в стереотаксическую рамку (David Kopf Instruments). На кожу наносили местный анестетик (лидокаин), обнажали поверхность черепа через кожный разрез и проделывали небольшое отверстие. Оптоволоконная канюля с плоским концом (длина 6 мм, диаметр сердцевины 200 мкм, числовое значение AP 0,48; Doric Lenses Inc.) была вставлена ​​(координаты от Bregma: -1,6 AP, 0,2 ML и -5,2 DV) и прикреплена к череп стоматологическим акрилом (разбавленный Super Bond C&B). Для повторной экспрессии NPY в ARC двусторонние инъекции вируса AAV8-EF1a-DIO-NPY (любезно предоставлены Dr.Z. Knight ¹¹ ) или контрольный вирус AAV8-hSyn-DIO-mCherry (Addgene, каталожный № 50459-AAV8, лот № v43120) были изготовлены непосредственно перед введением оптоволоконной канюли (300 нл; координаты от Bregma: −1,6 AP, ± 0,3 ML и от −6 до −5,8 DV). Перед пробуждением мышам делали подкожную инъекцию мелоксикама (5 мг / кг) для облегчения послеоперационной боли. После операции за мышами тщательно наблюдали и измеряли массу тела ежедневно в течение 1 недели. Все инъекции вируса и размещение волоконно-оптических канюль были гистологически проверены после экспериментов.Животные, у которых экспрессия вируса была очень низкой / отсутствовала или у которых оптоволоконная канюля была размещена неправильно, были исключены из исследования.

Фотостимуляция in vivo

Перед оптогенетическими экспериментами мышам позволяли восстановиться в течение по крайней мере одной недели после операции. Мышам с двусторонними инъекциями вируса давали возможность выздороветь в течение 3 недель. Затем их поместили в экспериментальные клетки для привыкания к кормушкам и водораздатчикам. Всех мышей обрабатывали ежедневно, чтобы уменьшить стресс во время последующих экспериментальных процедур.Примерно через неделю их подключили к оптоволоконному патч-корду (диаметр сердцевины 200 мкм, числовое значение AP 0,48; линзы Doric), подключенному к вращающемуся соединению (линзы Doric), и позволили адаптироваться к нему в течение еще 3–3 месяцев. 4 дня. В день экспериментов, в начале световой фазы, прикрепленный оптоволоконный патч-корд был заменен на новый. Протокол фотостимуляции следовал ⁵ , в котором лазерный свет применялся повторно в течение 1 с с последующим перерывом в 3 с.Частота фотостимуляции составляла 20 Гц при световых импульсах длительностью 10 мс. Использовалась мощность лазера 20 мВт, обеспечивающая освещенность ~ 3–7 мВт / мм ² в целевой области, как было рассчитано с помощью онлайн-инструмента на https://web.stanford.edu/group/dlab/cgi -bin / graph / chart.php, следовательно, выше порога активации ChR2 (~ 1 мВт / мм ^{2 33} ). Как подтверждено с помощью RNAscope, эта стимуляция приводила к последовательной и двусторонней активации нейронов AgRP (см. Рис. 1b, c). Все оптогенетические эксперименты начинали через 3 часа в световой фазе.На момент экспериментов все мыши были стабильны по массе тела.

Флуоресцентная гибридизация in situ

Мышей, которым имплантировали волоконно-оптические канюли, проводили фотостимуляцию в отсутствие пищи в течение 60 минут, затем подвергали глубокой анестезии и транскардиально перфузировали 0,9% физиологическим раствором, а затем ледяным 4% фосфатно-буферным PFA. Головы помещали в 4% фосфатно-буферный PFA на 4 часа. Канюли и мозг удаляли и переносили в 4% фосфатно-буферный PFA для последующей фиксации в течение 18 часов при комнатной температуре.Впоследствии мозг переносили в стерильный PBS, содержащий 25% сахарозы, и выдерживали в этом растворе при температуре 4 ^o ° C в течение 24 часов. Мозг разрезали на 14 мкм на замораживающем микротоме, собирали в стерильные контейнеры, содержащие криопротектор, и хранили при -20 ^o C до дальнейшего использования.

За день до анализа каждый 12-й срез по всему ARC был помещен на предметные стекла SuperFrost Plus Gold (ThermoFisher), высушен при комнатной температуре и затем инкубирован при 60 ^o C o / n.Для одновременного обнаружения мРНК Fos и AgRP и одновременного обнаружения AgRP , eGFP и POMC мы использовали флуоресцентный РНКскоп ^® (ACD; Advanced Cell Diagnostics Inc., Hayward, CA) . Все реагенты были приобретены в ACD, если не указано иное. Нацеленная на зонд Fos область 407–1427, номер доступа NM_010234.2. Нацеленная на зонд AgRP область 11–764, номер доступа NM_001271806.1. Нацеленная на зонд область 628–1352 eGFP , номер доступа NM U55763.1. Следует отметить, что зонд eGFP использовался для обнаружения eYFP, поскольку он распознает 100% eYFP. Нацеленная на зонд POMC область 19–995, код доступа # NM_008895.3. Отрицательный и положительный контрольные зонды, распознающие дигидродипиколинатредуктазу, DapB (бактериальный транскрипт) и циклофилин и PolR2A, соответственно, обрабатывали параллельно с зондами-мишенями для обеспечения целостности тканевой РНК и оптимальной производительности анализа. Все этапы инкубации выполнялись при 40 ^o ° C с использованием увлажненной камеры и печи HybEz.Протокол предварительной обработки был описан ранее ²³ , а протокол обнаружения соответствовал инструкциям производителя для набора RNAscope Multiplex Fluorescent v2. Для обнаружения зондов, направленных на мРНК Fos и AgRP , использовали тирамиды Cy3 и Opal520 (PerkinElmer), растворенные в ДМСО в соответствии с инструкциями производителя и разведенные 1: 3000 и 1: 2000 для рабочих растворов соответственно. . Для одновременного обнаружения AgRP , eGFP и POMC зонды и соответствующие рабочие растворы тирамидов разбавляли следующим образом: AgRP (1: 100) -Opal520 (1: 1000), eGFP (1: 50) -Cy3 (1: 750) и POMC (1: 100) -Cy5 (1: 3000).

Иммуногистохимия

Мозги мышей с двусторонними инъекциями вируса собирали и после фиксировали, как описано выше, и разрезали на 30 мкм на замораживающем микротоме. Для обнаружения NPY использовали моноклональное кроличье антитело против NPY (1: 1000; каталожный номер 11976, Cell Signaling Technology), визуализированное с помощью вторичного антитела осла против кролика Alexa 647 (1: 500, каталожный номер A31573, Invitrogen. ). Эндогенная флуоресценция mCherry была очевидна без какого-либо иммуногистохимического обнаружения.

Визуализация и количественная оценка

Изображения для количественной оценки данных РНК-скопа получали с помощью конфокального микроскопа Leica TCS SP-8-X, оснащенного масляным объективом × 40 / 1,30. Сканы плитки и Z-стеки (оптическое сечение 1,0 мкм) из 4–5 срезов, содержащих ARC на животное, были захвачены в одностороннем порядке от рострального до каудального. Интенсивность лазера для различных каналов поддерживалась постоянной на протяжении всего процесса визуализации. Прогнозы максимальной интенсивности были сделаны в FIJI (NIH), а сигнал DAPI был скорректирован в отношении контраста и яркости.Каналы зондов не подвергались модификации. Каналы были объединены и импортированы в программное обеспечение Halo (Indica Labs), которое использует окрашивание DAPI для автоматического распознавания клеток. На основе каждой определенной ячейки и детектированного зондового сигнала в каждой ячейке программное обеспечение вычисляет интенсивность ячейки, которая представляет собой интегрированное число интенсивности зондирующего сигнала и площади каждой ячейки, покрытой зондом. Для одновременного обнаружения AgRP , eGFP и POMC подсчет проводился вручную с использованием DAPI в качестве эталона для совместной локализации сигнала AgRP / POMC с сигналом eGFP .Количественно оценивали от 3 до 6 гемисекций на животное. Для микрофотографий на рис. 1c, один срез от каждого генотипа был изображен с той же конфокальной линзой и объективом; при разрешении 1024 × 1024 и скорости сканирования 200 мс. Для рис. 5 PVH и ARC от одного животного из каждой экспериментальной группы были отображены с помощью объектива × 20 / 0,75 имм., Скорость сканирования 400 мс. Изображения были обрезаны и отредактированы в Adobe Photoshop CC с учетом яркости и контрастности. Настройки были применены одинаково ко всем изображениям.

qPCR

Мышей приучали к манипуляциям за одну неделю до эксперимента. Накануне эксперимента мышам давали свежую клетку. Утром экспериментального дня из клеток удаляли остатки корма. Примерно через 3 часа световой фазы мышам вводили i.p. инъекция CNO (Sigma Aldrich) и еда была удалена. Через 60 мин их обезглавили и быстро удалили мозг. Срез мозга, содержащий гипоталамус, охлаждали на сухом льду, а вентральную часть гипоталамуса вырезали и быстро замораживали в жидком азоте.Общую РНК выделяли с использованием набора mirVana Isolation Kit (Ambion) в соответствии с инструкциями производителя. РНК подвергали обратной транскрипции с помощью набора для обратной транскрипции кДНК высокой емкости (Applied Biosystems) с использованием случайных гексамерных праймеров. qPCR проводили с использованием Takyon LowRox MasterMix dTTP Blue (Eurogentec) и системы ПЦР в реальном времени QuantStudio 7 Flex (Applied Biosystems). Гипоксантингуанинфосфорибозилтрансферазу (Hprt) использовали в качестве гена домашнего хозяйства для нормализации в каждом образце.В качестве зондов TaqMan использовали AgRP (Mm00475829_g1) и NPY (Mm00445771_m1) (Applied Biosystems). Данные были проанализированы с использованием метода ΔCt.

Электрофизиология

Мышей глубоко анестезировали и декапитировали, мозг быстро помещали в ледяной раствор для резки, состоящий из (в мМ): 92 хлорида холина, 30 NaHCO _3, 25 глюкозы, 20 HEPES, 10 MgSO ₄ , 2,5 KCl, 1,25 NaH ₂ PO ₄ , 5 аскорбат натрия, 3 пируват натрия, 2 тиомочевина, 0.5 CaCl ₂ насыщенный кислородом 95% O ₂ /5% CO ₂ , измеренная осмолярность 310–320 мОсм / л. Коронковые срезы толщиной 300 мкм вырезали с помощью вибратома Campden (модель 7000smz-2) и инкубировали в насыщенном кислородом режущем растворе при 34 ° C в течение 10 мин. Срезы переносили в оксигенированный aCSF, состоящий из (в мМ; 126 NaCl, 21,4 NaHCO ₃ , 2,5 KCl, 1,2 NaH ₂ PO ₄ , 1,2 MgCl ₂ , 2,4 CaCl ₂ , 10 глюкозы) при 34 ° C в течение 30 минут и хранить в том же растворе при комнатной температуре (20–24 ° C) не менее 60 минут перед записью.Одиночный срез помещали в записывающую камеру, где он непрерывно переливали со скоростью 3–4 мл / мин оксигенированным aCSF. Нейроны визуализировали с помощью вертикального микроскопа (SliceScope, Scientifica), оснащенного инфракрасным дифференциальным интерференционным контрастом и флуоресцентной оптикой. Микроэлектроды из боросиликатного стекла (5–7 МОм) были заполнены внутренним раствором на основе Cs ⁺ , состоящим из (в мМ): 135 CsMeSO ₃ , 10 HEPES, 1 EGTA, 4 MgCl ₂ , 4 Na ₂ -АТФ, 0.4 Na ₂ -GTP, 10 Na ₂ -фосфокреатин (pH 7,3, установленный с помощью CsOH; 295 мОсм · кг ^-1 ). Для фотостимуляции терминалов AgRP, экспрессирующих ChR2, светодиодный источник света (473 нм) был сфокусирован на задней апертуре объектива микроскопа, создавая широкопольное воздействие вокруг регистрируемых клеток. Вызванные светом IPSC регистрировались из нейронов PVH в режиме фиксации напряжения всей клетки, с фиксированным мембранным потенциалом В _ч = 0 мВ в присутствии CNQX (10 мкМ) и D-AP5 (50 мкМ) для блокирования глутаматергическая синаптическая передача.Бикукуллин (10 мкМ) добавляли к aCSF для блокирования ГАМКергической синаптической передачи. Все записи производились с использованием усилителя Multiclamp 700B, данные фильтровались с частотой 2 кГц и оцифровывались с частотой 10 кГц. Протокол обнаружения вызванного светом IPSC состоял из четырех импульсов синего света (длина волны 473 нм, 5 мс), подаваемых с интервалом в 1 с в течение первых 4 с 8-секундной развертки. Вызванные IPSC с короткой задержкой (<10 мс) при световой стимуляции и низким дрожанием считались управляемыми светом. Светоотдача контролировалась программируемым импульсным стимулятором Мастер-8 (А.M.P.I.) и программное обеспечение pClamp (Axon Instruments). Все записи были проанализированы в автономном режиме с помощью Clampfit.

Прием пищи и двигательная активность

Использовалась автоматизированная система регистрации приема пищи, в которой каждый кормовой бункер был подключен к датчику (TSE Systems). Рамки активности, окружающие каждую клетку, позволяли проводить одновременные измерения опорно-двигательного аппарата (системы TSE). За два дня (оптогенетика) или за день (хемогенетика) до экспериментов мыши получали свежие клетки. В день эксперимента, в начале световой фазы, остатки корма удаляли из клеток, и запись начиналась через 3 часа.После 1 часа нестимулированной записи (до периода) лазеры были включены в течение 2 часов, а затем 1 час без стимуляции (постпериод) для оптогенетики. После инъекции CNO или носителя (физиологический раствор в присутствии ДМСО) началось измерение для хемогенетики.

Двигательная активность в отсутствие пищи

За два дня (оптогенетика) или за один день (хемогенетика) до экспериментов мышей помещали в свежие клетки. В начале световой фазы в день эксперимента все остатки пищи тщательно удаляли.Емкости для еды удаляли перед тем, как инициировать световую стимуляцию или вводить CNO, и рамки активности использовали в течение 60 минут для определения двигательной активности (TSE Systems).

Гистология

Мышей декапитировали и головы переносили в 4% фосфатно-буферный формальдегид (PFA). По крайней мере, через 10 дней оптоволоконные канюли были удалены, мозг препарирован и перенесен в 4% фосфатно-буферный PFA, содержащий 25% сахарозы. После уравновешивания в этом растворе сахарозы мозг вырезали на 30 мкм на замораживающем микротоме, окрашивали NeuroTrace ™ 500/525 (1: 250; ThermoFisher Scientific) и визуализировали для определения размещения волоконно-оптических канюль.

Прием пищи и расход энергии: Chemogenetics

Для измерения потребления пищи и расхода энергии использовалась система непрямой калориметрии с открытым контуром (PhenoMaster; TSE Systems). Для записи приема пищи мышей, ранее проживавших отдельно и привыкших к клеткам PhenoMaster, кормушкам и диспенсерам для воды, помещали в камеры PhenoMaster за день до эксперимента. В день эксперимента, через 3 ч после начала светового цикла, мышам давали i.п. инъекции CNO или носителя и немедленно возвращались в свои клетки, где автоматически регистрировались потребление пищи и расход энергии. Для измерений в отсутствие пищи мышам давали чистую клетку в начале световой фазы в день эксперимента. Через три часа корм убирали, мышам вводили внутрибрюшинно. с CNO и сразу же вернулись в свои клетки. Данные о расходе энергии были скорректированы с учетом безжировой массы, как определено с помощью сканера IVIS SpectrumCT (Caliper LifeScience, США) ³⁴ .

Тест на толерантность к инсулину

ITT с хемогенетической или оптогенетической стимуляцией нейронов AgRP выполняли, как описано ранее ⁷ . Мыши получали чистую клетку за один (хемогенетика) или два (оптогенетика) дня до экспериментов. В день эксперимента в начале световой фазы из клеток осторожно удаляли остатки пищи.

Голодание и повторное кормление

Самцов мышей на фоне NPY ^{вес / вес} и NPY ^{∆ / ∆} содержали по отдельности и снабжали емкостями для корма для измерения потребления пищи в течение, по крайней мере, 10 дней до экспериментов.В начале темной фазы мыши получали свежие клетки без еды. После 16-часового голодания бункеры с кормом, заполненные кормом, помещали обратно в клетки и вручную записывали потребление корма в выбранные моменты времени в течение 24 часов.

Статистика

Статистический анализ проводился с использованием GraphPad Prism версии 7, и значимость принималась, когда значение p было ниже 0,05. Был проведен двухфакторный дисперсионный анализ с последующим апостериорным тестом (Тьюки или Сидак, подробнее в подписях к рисункам), когда сравнивались две переменные.Односторонний дисперсионный анализ выполнялся, когда сравнивалась только одна переменная (генотип).

Сводка отчетов

Дополнительная информация о дизайне исследований доступна в Сводке отчетов по исследованиям природы, связанной с этой статьей.

5 Функции регулирующего органа финансовой индустрии, Inc.

Основные обязанности FINRA по надзору

• Просвещение и доступ к информации
• Обнаружение и предотвращение мошенничества
• Создание правил и положений
• Обеспечение соблюдения
• Регистрация и лицензирование

The US Financial Industry Regulatory Authority, Inc.(FINRA) — это частная организация, на которую федеральное правительство разрешило выполнять несколько официальных регулирующих функций. Этой организации предшествовала ныне несуществующая Национальная ассоциация дилеров по ценным бумагам, Inc. Ее основная цель — защищать инвесторов путем обеспечения прозрачности, безопасности и этических норм в сфере брокерско-дилерской деятельности. Организация имеет значительные полномочия для создания и обеспечения соблюдения нормативных требований в пределах своей области.

См. Наш рейтинг 30 самых доступных онлайн-программ бакалавриата в области финансов.

1. Государственное образование и доступ к информации

Одним из основных способов помощи организации инвесторам является облегчение доступа к информации о брокерах и их фирмах. Они также спонсируют образовательные мероприятия по информированию людей о потенциальных рисках различных типов инвестирования, а также о стратегиях безопасного обращения с деньгами на рынке. Официальный веб-сайт организации включает доступ к BrokerCheck, цифровому инструменту, который помогает пользователям выполнять поиск в подробной базе данных, которая включает статус регистрации и профессиональную историю брокеров или фирм.

2. Выявление и предотвращение мошенничества

Выявление и устранение мошенничества в отрасли — еще одна из основных обязанностей FINRA, которую они выполняют, обращаясь как к инвесторам, так и к брокерам. В дополнение к их усилиям по обучению инвесторов, они также предлагают онлайн-утилиты, такие как Scam Meter и Risk Meter, чтобы помочь людям идентифицировать потенциальные риски, согласно регулирующему органу финансовой индустрии. Организация также борется с мошенничеством в отрасли, применяя науку о данных к информации, собранной со всех рынков.

3. Создание правил и положений

В качестве саморегулируемого агентства регулирующий орган разрабатывает официальные правила и положения, которым должны следовать члены брокера. Хотя окончательная власть над регулированием и правоприменением принадлежит официальной Комиссии по ценным бумагам и биржам (SEC), регулирующий орган по-прежнему имеет значительное влияние в этой области. Требования, устанавливаемые организацией, обычно более строгие, чем базовые требования, установленные федеральными властями, чтобы лучше способствовать справедливости, прозрачности и этичности поведения.

4. Обеспечение соответствия

Несмотря на свой статус частной корпорации, регулирующий орган финансовой отрасли также имеет значительные рычаги воздействия при обеспечении соблюдения своих правил. Организация может проводить аудиты, чтобы убедиться, что фирмы и брокеры соблюдают правила. Они также инициируют дисциплинарные меры в отношении правонарушителей, налагают штрафные санкции и помогают инвесторам возместить убытки из-за ненадлежащего поведения. Помимо финансовых штрафов, принудительные меры могут также принимать форму приостановки или полного запрета на деятельность отрасли.

5. Регистрация и лицензирование

Отдельные брокеры и фирмы должны подавать документы в FINRA и запрашивать соответствующее лицензирование, чтобы получить зарегистрированный статус в организации. Процесс регистрации помогает властям гарантировать, что брокеры являются квалифицированными и заслуживающими доверия профессионалами. Организация также может отозвать или приостановить членство в рамках дисциплинарных мер, что может стать серьезным сдерживающим фактором для тех, кто хочет создать прочную репутацию в отрасли.

Общеизвестно, что финансовую отрасль сложно контролировать, что является одной из причин, по которой федеральное правительство делегирует некоторые обязанности регулирующему органу. Хотя FINRA может и не поймать каждого преступника в отдельности, она выполняет множество жизненно важных функций, помогая инвесторам и авторитетным брокерам вести бизнес в открытой и справедливой среде.

Регуляторные роли 5 ‘UTR Escherichia coli и внутренних РНК ORF, обнаруженные с помощью 3’ концевого картирования

Существенных изменений:

1) Сравнение глобальных наборов данных: для перекрестного сравнения было бы желательно, чтобы текущие наборы данных и ранее опубликованные были проанализированы последовательно.Это может увеличить совпадение результатов различных исследований.

Мы столкнулись с рядом сложностей, которые помешали единообразным сравнениям. Например, статья Дара и Сорека Term-seq не идентифицирует глобально 3´ концы, а скорее сообщает только 3´ концы непосредственно после аннотированных ORF. Поэтому мы сравнивали только наши «первичные 3´ концы» (ниже аннотированных ORF) с этим набором данных. Другой пример — исследование Ju et al. опубликовали одну таблицу 3´ концов, идентифицированных на основе логарифмической и стационарной фазы роста бактерий вместе, без различения 3´ концов, идентифицированных в каждом состоянии.Поэтому мы сравнили наши 3´ концы, идентифицированные из условий LB 0.4 и 2.0, с этим набором данных. Мы считаем, что такой подход позволяет наиболее точно сравнивать данные.

a) Term-seq: Вычислительный метод, используемый для обработки текущих данных Term-seq, отличается от метода, представленного в исходной статье Term-seq Дара и Сорека. Авторы должны объяснить, почему они обратились к другому вычислительному конвейеру, и — для перекрестного сравнения — повторно проанализировать опубликованный набор данных от Дара и Сорека, используя свою собственную вычислительную методологию, или проанализировать свои результаты с помощью вычислительного метода Дара и Сорека.

Вкратце, метод, описанный Даром и Сореком, основывался на сохранении наиболее хорошо покрытого, воспроизводимого 3´ конца ниже гена, так что сохраняемое положение должно было быть обнаружено по крайней мере в 2 независимых экспериментах со средним охватом не менее 4 чтений во всех трех повторах. Порог «не менее 4 чтений» метода Дара и Сорека полностью зависит от глубины секвенирования конкретной реплики и характеристик эксперимента, поэтому трудно обобщить этот порог на другие эксперименты.Кроме того, метод Дара и Сорека не учитывает вариабельность репликации.

Вместо этого наш метод начинается с этапа определения пика с использованием функции scipy.signal.find_peaks, обычно используемой в электронной обработке сигналов. Затем следует статистически обоснованное сравнение воспроизводимости реплик (коэффициент невоспроизводимого обнаружения, IDR), в котором используется ранговый подход для определения пиков, которые являются как сильными, так и последовательными среди реплик. Взятые вместе, эти два шага реализованы в нашем пакете вызова term-seq с открытым исходным кодом https: // github.com / NICHD-BSPC / termseq-peaks приводит к методу, который не зависит от охвата выборки и в то же время учитывает изменчивость репликации, высоко оценивая те пики, которые находятся в постоянных рангах в репликах. Эмпирически мы наблюдаем, что результаты нашего метода намного лучше соответствуют результатам ручных наблюдений в браузере генома, чем подход Дара и Сорека. Кроме того, мы успешно использовали тот же метод с двумя другими видами бактерий (в неопубликованной работе), что подтверждает универсальность нашего подхода.

Как было предложено, мы повторно проанализировали данные в статье Дара и Сорека, используя наш алгоритм, и сравнили эти 3´ конца с нашими. Результаты были добавлены к рисунку 1 — добавлению к рисунку 2. К основному тексту было добавлено следующее утверждение: «Учитывая, что предыдущее исследование E. coli Term-seq сообщало только о 3′-концах нижестоящих аннотированных генов (Dar and Sorek, 2018b), мы также использовали наш алгоритм 3´ конца вызова для повторного анализа данных секвенирования из этого исследования (Рисунок 1 — приложение к рисунку 2D).Опять же, было значительное совпадение (гипергеометрический тест p <2.2e ^-16 ), но 51% были уникальными для нашего исследования ».

b) Rho-зависимая терминация: поскольку авторы здесь приложили усилия для обработки клеток BCM и создания библиотек секвенирования, неясно, почему они просто не выполнили Term-seq после обработки BCM и не сравнили идентифицированные 3′-концы. тем, которые определены без BCM. Скорее, авторы следовали анализу Dar и Sorek, которые использовали доступные данные о клетках, обработанных BCM, от Peters et al., 2012, и, следовательно, мог оценивать чтение только вблизи определенных 3 ‘концов. Здесь также авторы модифицировали вычислительный метод Дара и Сорека. Это требует обоснования, и следует объяснить используемые параметры (например, почему используется размер окна 500 нт и порог оценки Rho, равный 2). Для перекрестного сравнения результатов набор данных Dar и Sorek и текущий набор данных должны быть проанализированы одним и тем же методом.

Term-seq +/- BCM не будет эффективным для идентификации всех Rho-зависимых терминаторов, поскольку наши данные показывают, что во многих случаях численность 3´ концов не уменьшается после обработки BCM.Предположительно это связано с тем, что 3´ -концы генерируются обработкой РНКазой, а не непосредственно Rho, и обработка может происходить даже тогда, когда транскрипция считывается через терминатор. Наш подход оценивал баллы Rho для всех регионов в данных DirectRNA-seq (не только для 3´ концов, идентифицированных Term-seq, хотя мы действительно оценивали каждый из концов Term-seq 3´ специально для терминации Rho). Дополнительный файл 2 представляет собой список всех предполагаемых областей терминации Rho, идентифицированных только с помощью DirectRNA-seq.

Размер окна и пороговые значения, которые мы использовали, были несколько произвольными. На основании комментариев рецензента мы провели эмпирический анализ этих параметров, что позволило нам оптимизировать чувствительность и специфичность нашего подхода. Как следствие, мы внесли несколько улучшений в наш конвейер анализа, хотя основной подход остался прежним: мы подсчитываем количество считываний последовательностей в данных DirectRNA-seq в окне вверх по течению и в окне ниже по течению от интересующей координаты генома для необработанных и Наборы данных, обработанные BCM.Затем мы сравниваем эти числа, ища случаи, когда соотношение нисходящих и восходящих потоков выше в наборе данных, обработанном BCM, чем в необработанном наборе данных. Хотя новый конвейер принципиально похож на старый, есть несколько важных улучшений. Во-первых, мы больше не используем оценку Rho для установки порогового значения для вызова Rho-зависимых терминаторов. Использование показателя Rho потребовало от нас установить порог минимального количества чтений в каждом окне, чтобы не брать отношения очень маленьких чисел. Теперь мы используем точный тест Фишера для сравнения оценок для каждого окна, устраняя необходимость в минимальном пороге количества считываний.

Во-вторых, мы увеличили размер окна до 800 нт. Это основано на тщательном анализе ROC (см. Изображение ответа автора 1). В частности, мы выбрали 50 наиболее Rho-зависимых и 50 наименее Rho-зависимых терминаторов, идентифицированных Dar и Sorek; они служили истинно положительным и истинно отрицательным, соответственно. Затем мы рассчитали частоту истинных положительных результатов (TPR) и частоту ложных положительных результатов (FPR), используя наш метод с разными пороговыми значениями p (из точного теста Фишера). Таким образом, мы сгенерировали графики ROC, которые показывают FPR и TPR в диапазоне пороговых значений p (см. Изображение ответа автора 1, левая панель, для размера окна 800 нт).Мы создали графики ROC для различных размеров окна (100-1000 нт, с шагом 100 нт). Размер окна, который давал наибольшую площадь под кривой на графиках ROC, составлял 800 нт (см. Изображение ответа автора 1, правая панель). Мы также провели аналогичный анализ, используя различные размеры окон восходящего и нисходящего потоков, включая размеры окон, используемые Даром и Сореком, но площадь ROC под значениями кривой неизменно была ниже, чем те, которые мы определили для окна 800 нт с обеих сторон. Используя размер окна 800 нт, мы выбрали пороговое значение p, которое дает наибольшее значение TPR-FPR, которое в данном случае равно 0.64 (TPR = 0,72, FPR = 0,08; точка данных обведена кружком на изображении ответа автора 1, левая панель). Наконец, мы применили эти параметры для вызова пиков из данных DirectRNA-seq, идентифицируя 1078 предполагаемых сайтов Rho-зависимой терминации. Важно отметить, что области вокруг этих сайтов имеют такое же соотношение C: G, что и в предыдущем списке (рис. 1D), а также с предполагаемыми сайтами терминации Rho, идентифицированными Peters et al.

2) Оценка статистической значимости: не всегда ясно, как были вычислены указанные p-значения гипергеометрических тестов, и невозможно их повторно вычислить, поскольку значение N не было предоставлено.Убедитесь, что p (x ≥ фактический результат) было вычислено, и предоставьте подробную информацию о вычислениях для всех гипергеометрических тестов, включенных в рукопись.

В раздел «Материалы и методы» добавлено описание проведенных гипергеометрических тестов. Цифры, использованные для тестов, были взяты из каждой отдельной фигуры. Обратите внимание, что статистическая значимость перекрытий чрезвычайно высока, поскольку количество проанализированных геномных координат велико, однако значения p указаны как <2.2e ^-16 , поскольку это машинный эпсилон для 64-битных значений двойной точности в R и Python.

Следующий пример был добавлен к тексту, чтобы позволить читателям повторно вычислить значения p. «Например, на Рисунке 1 — дополнение к рисунку 2C, 219 из 296 3´ концов в наборе данных LB 0.4 находятся в пределах 10 узлов от 3´ конца в наборе данных Dar и Sorek. Мы определили, сколько геномных позиций находится в пределах 10 нуклеотидов от позиции в наборе данных Dar и Sorek (22899 позиций). Входными параметрами для гипергеометрического теста были 219 (количество успехов), 296 (размер выборки), 22899 (количество успехов в популяции) и 9283304 (размер популяции; удвоенная длина генома для учета двух возможных ориентаций). .”

3) Экспериментальная проверка: несколько недавно обнаруженных сайтов терминации 3 ‘были протестированы экспериментально. Судя по представленным результатам, все проверенные участки были подтверждены экспериментами с влажной лабораторией. Не могли бы авторы объяснить, как отбирались отдельные примеры? Были ли какие-либо предсказанные 3’-концы, которые нельзя было проверить экспериментально? Если это так, то отчет о достоверных и ложных срабатываниях обеспечит еще одну оценку надежности данных.

Мы выбрали сайты с поперечным сечением диапазона оценок Rho для 28 примеров, проанализированных слиянием lacZ .Показаны все 3 конца, которые мы тестировали. Основываясь на кратности индукции по сравнению с оценками Rho, пять из этих примеров могут быть ложноположительными для Rho-опосредованной регуляции. Примеры, выбранные для северного анализа, были выбраны из-за других известных или прогнозируемых норм. Мы думаем, что числа, полученные северным анализом, слишком малы, чтобы можно было комментировать истинные и ложные положительные результаты. Текст был изменен, чтобы лучше передать эту информацию.

4) Rho-зависимая преждевременная терминация (–подраздел «Новые сайты регуляции предсказываются по 3´ концам и участкам терминации Rho в 5´ UTRs»; Рисунок 2D, E, F): результаты, полученные с некоторых из северных блоттингов, кажутся сбивает с толку в свете соответствующих анализов репортера LacZ.Например, эксперименты с галактозидазой с клетками с OD 0,4 ~ 0,6 показали увеличение активности LacZ в мутанте rhoR66S для большинства репортеров, как и ожидалось (рисунок 2D, E и рисунок 2 — рисунок в приложении 1B). С другой стороны, в нескольких случаях Нозерн-блот анализ общей РНК, экстрагированной из клеток при OD 0,4, выявил увеличение преждевременно завершенных фрагментов 5’UTR в штамме rhoR66S (Рисунок 2F и Рисунок 2 — рисунок в приложении 1C). Не следует ли ожидать, что эти 5′-фрагменты будут накапливаться в штамме WT, а не в штамме R66S, если они были образованы посредством Rho-зависимой терминации? Гипотеза авторов о том, что повышенные уровни более длинных транскриптов в отсутствие Rho могут быть обработаны с образованием этих более коротких продуктов (см. Вышеупомянутый подраздел), может быть лучше объяснена.Параллельно мембраны Нозерн-блоттинга должны быть повторно гибридизированы с зондами для некоторых последовательностей ниже сайтов терминации, чтобы подтвердить это предположение.

Мы также были очень удивлены этим накоплением 5´ UTR-фрагментов в штамме rhoR66S, но обнаружили, что это верно во многих изученных нами примерах. 3´ -концы, образующиеся после преждевременной терминации Rho, вероятно, являются результатом процессинга экзонуклеазами. Это все еще может происходить в транскриптах, в которых РНК-полимераза прочитала терминатор, если предположить, что существует эндонуклеаза, которая разрезает ниже по течению.

Как предложили обозреватели, теперь мы пытаемся лучше объяснить нашу гипотезу. Мы также использовали образцы РНК на рисунке 2F для агарозного геля Northern, который мы исследовали на предмет кодирующих последовательностей (ниже идентифицированных 3´ концов) для cfa , cyaA , speA и mdtJI . Эти блоты, добавленные к рисунку 2 — рисунку в приложении 1, показали гораздо более высокие уровни считывания у мутанта rhoR66S.

5) губки sRNA: точное действие RybB на FtsO не было разъяснено в рукописи (подраздел «ORF-внутренний FtsO является губкой sRNA»).Когда RybB в изобилии, уровень FtsO снижается (Рисунок 7B). Это может указывать на сопряженную деградацию при спаривании оснований между FtsO и RybB. Однако, когда RybB был индуцирован этанолом (рис. 7E), уровень FtsO не изменился (или даже увеличился), что, вероятно, связано с активацией транскрипции ftsI. Чтобы прояснить реципрокную регуляцию между RybB и FtsO и последствия их взаимодействия, необходимо количественно определить период полужизни каждой мРНК в присутствии или отсутствии ее аналога мРНК.Кроме того, (косвенный) эффект FtsO на целевой ompC RybB не очень выражен (рис. 7E). Не могли бы авторы количественно оценить этот эффект на уровне белка (например, с помощью вестерн-блоттинга, анализа ß-gal), чтобы дополнительно подтвердить идею о том, что опосредованное FtsO спонгирование RybB приводит к дерепрессии мишеней RybB?

Мы провели ряд дополнительных экспериментов, чтобы решить несколько различных проблем, поднятых в этом комментарии. (i) Чтобы проверить, имеет ли место сопряженная деградация при спаривании оснований между FtsO и RybB, мы исследовали влияние сверхэкспрессии RybB на уровни FtsO (Рисунок 8 — приложение к рисунку 1A).Мы обнаружили, что действительно существует обратный эффект RybB на FtsO для ячеек со стационарной фазой. Это сейчас обсуждается в тексте. (ii) Чтобы дополнительно проверить влияние FtsO на мишень RybB ompC , мы сравнили уровни мРНК ompC и белка при сверхэкспрессии FtsO и ранее охарактеризованной губки RybB, RbsZ (Рисунок 8 — приложение к рисунку 1B). Как для FtsO, так и для RbsZ мы наблюдали явное увеличение уровней мРНК ompC , но не наблюдали очевидного воздействия на белок OmpC.Вероятно, это связано с обильными, стабильными уровнями OmpC, присутствующими в этом состоянии. Теперь об этом говорится и обсуждается в тексте. Мы также повторно прогнали северную агарозу на рисунке 8E (ранее рисунок 7E), чтобы получить сигнал 5S лучшего качества.

https://doi.